[发明专利]一种荧光探针及其在DNA检测中的应用

说明书

本发明涉及一种荧光探针及其在DNA检测中的应用，通过简单混合SiNDs和Ru(bpy)₂(dppx)²⁺，建立了一种于水相中比率荧光检测DNA的方法。Ru(bpy)₂(dppx)²⁺能够特异性高效识别DNA，且二者作用不影响Ru(bpy)₂(dppx)²⁺对SiNDs荧光的猝灭。基于此，构建了用于比率荧光检测DNA的SiNDs‑Ru(bpy)₂(dppx)²⁺探针。该探针具有灵敏度高、选择性好、抗干扰能力强等优点，能够实现低浓度DNA的可视化检测以及人血清中目标DNA的定量检测。

技术领域

本发明涉及DNA检测技术领域，具体涉及一种荧光探针及其在DNA检测中的应用。

背景技术

脱氧核糖核酸(DNA)是生命体中最基本的物质之一。DNA异常是许多疾病的重要原因，包括癌症。因此，建立和发展DNA灵敏检测方法对临床诊断、发病机制研究和基因治疗具有重要的意义。目前检测DNA的方法有表面增强拉曼散射法、比色法、荧光法等。其中，比率荧光法因其自校正的优点而受到越来越多的关注。硅点(SiNDs)是一种新型的荧光材料，由于其制备绿色、光学性能优异和生物相容性好等优点，被用于生物分析、荧光成像、对映体识别和防伪等方面。不同方法合成的SiNDs的荧光可选择性地被某些离子或荧光染料猝灭，因此，SiNDs可用于特定目标物的检测(如Cr⁶⁺、Hg²⁺、NO^2-)。然而，利用配合物对SiNDs荧光的猝灭作用来检测分析物的报道很少。

发明内容

本发明的目的在于设计一种用于DNA检测的荧光探针，提供构建可视化检测溶液中痕量DNA和定量分析人血清中目标物的新方法。

本发明解决上述技术问题所采用的方案是：

一种荧光探针，包括在缓冲液中均匀混合的硅点和Ru(bpy)₂(dppx)²⁺(多吡啶钌(II)配合物,其中，bpy＝2,2'-联吡啶，dppx＝7,8-二甲基吡啶[3,2-a:2',3'c]并吩嗪)。

优选地，所述缓冲液中硅点和Ru(bpy)₂(dppx)²⁺的比例为400μg/mL：7.5～112.5μmol/L。

优选地，所述缓冲液为磷酸盐浓度为50mM的PBS缓冲液，所述PBS缓冲液的pH 7.4，NaCl含量为80～180mmol/L。

优选地，所述缓冲液中硅点和Ru(bpy)₂(dppx)²⁺的浓度分别为400μg/mL以及20μmol/L。

本发明的另一目的是提供上述荧光探针的制备方法，将Ru(bpy)₂(dppx)²⁺和SiNDs在缓冲液中涡旋混匀即得。

本发明的另一目的是提供上述荧光探针在DNA检测中的应用。

优选地，再进行DNA检测时，向所述荧光探针中加入DNA，测定其荧光光谱，所用激发波长为359nm,激发和发射狭缝分别为10nm、5nm，根据601nm和448nm波长处的荧光强度计算信号比I₆₀₁/I₄₄₈。