[发明专利]检测轮状病毒/诺如病毒的试剂盒及其应用在审
申请号: | 202011479228.5 | 申请日: | 2020-12-15 |
公开(公告)号: | CN112526130A | 公开(公告)日: | 2021-03-19 |
发明(设计)人: | 张祺;刘为勇;刘芳;刘映乐;屈三甫;梅益 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;C12N15/10 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 张火春 |
地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 轮状病毒 病毒 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种快速检测轮状病毒/诺如病毒的试剂盒,包括以下组分:A)固定样本溶液的蛋白包被板,B)蛋白包被液,C)封闭液,D)漂洗液,E)样本前处理液,和F)带有荧光基团标记的核酸适配体,其特征是,核酸适配体含有轮状病毒的核酸适配体和诺如病毒II型的核酸适配体,两种适配体的荧光基团相异。
2.根据权利要求1所述的检测轮状病毒/诺如病毒的试剂盒,其特征在于轮状病毒的核酸适配体具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,诺如病毒II型的核酸适配体具有SEQ IDNO.2所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的检测轮状病毒/诺如病毒的试剂盒,其特征在于B)蛋白包被液是由35mM NaHCO3,15mM Na2CO3,pH 9.3-pH 9.9组成的,C)封闭液是由136mM NaCl,2.6mMKCl,2mM KH2PO4,8mM Na2HPO4,0.05%Tween-20,1%BSA,pH 7.1-pH 7.7组成的,D)漂洗液是由136mM NaCl,2.6mM KCl,2mM KH2PO4,8mM Na2HPO4,0.05%Tween-20,pH 7.1-pH 7.7组成的,E)样本前处理液是由150mM NaCl,1%Triton X-100,50mM Tris,pH7.8-pH8.2组成的。
4.根据权利要求3所述的检测轮状病毒/诺如病毒的试剂盒,其特征在于B)蛋白包被液是由35mM NaHCO3,15mM Na2CO3,pH 9.6组成的,C)封闭液是由136mM NaCl,2.6mM KCl,2mMKH2PO4,8mM Na2HPO4,0.05%Tween-20,1%BSA,pH 7.4组成的,D)漂洗液是由136mM NaCl,2.6mM KCl,2mM KH2PO4,8mM Na2HPO4,0.05%Tween-20,pH 7.4组成的,E)样本前处理液是由150mM NaCl,1%Triton X-100,50mM Tris,pH8.0组成的。
5.根据权利要求1所述的检测轮状病毒/诺如病毒的试剂盒,其特征在于核酸适配体序列上接有功能基团,功能基团为各种生物素标记物、发光标记物和酶标标记物,发光标记物选自FAM、VIC荧光基团中的一种,两种适配体的荧光基团相异。功能基团通过共价键的方式连接到核酸适配体的5’端。
6.一种制备权利要求1中检测轮状病毒/诺如病毒的试剂盒,其特征是,轮状病毒的核酸适配体以A组轮状病毒靶蛋白抗原表位具有如SEQ ID No.3所示序列氨基酸,通过SELEX技术筛选所得;诺如病毒的核酸适配体以诺如病毒II型靶蛋白抗原表位具有如SEQ IDNo.4所示序列氨基酸,通过SELEX技术筛选所得;再将荧光基团以共价键的形式连接到核酸适配体的5’端。
7.权利要求1中所述检测的试剂盒在同时检测轮状病毒/诺如病毒中的应用。
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