[发明专利]一种联产1,2,4-丁三醇和聚羟基丁酸酯的方法有效
申请号: | 202011480797.1 | 申请日: | 2020-12-15 |
公开(公告)号: | CN112501100B | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
发明(设计)人: | 诸葛斌;郭超;冯奥;狄莹莹;陆信曜;宗红 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/31;C12N15/70;C12P7/18;C12P7/625;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 联产 醇和 羟基 丁酸 方法 | ||
1.一种联产1,2,4-丁三醇和聚羟基丁酸酯的方法,其特征在于,所述方法为,发酵微生物为重组大肠杆菌;将所述 发酵微生物接种至种子培养基中,在37℃,150rpm摇床中培养7h,得到一级种子液,将一级种子液按照1%的接种量,接种到种子培养基中,37℃,150rpm摇床中培养8h,制备得到二级种子液;将二级种子液按照10%的接种量接种至含有木糖和葡萄糖的发酵培养基中,添加IPTG诱导培养,制备得到1,2,4-丁三醇和聚羟基丁酸酯,所述发酵培养基为:葡萄糖10~15g/L,木糖20~30g/L,酵母粉5.0~7.5g/L,氯化钠10~15g/L,蛋白胨10~15g/L;
所述培养条件为,添加IPTG至终浓度为0.5mmol/L,IPTG添加时间为发酵开始后1.5h,木糖添加时间为发酵开始后0h,初始葡萄糖消耗完之后补加10g/L葡萄糖,温度为34~37℃,转速为250~300rpm rpm,通气比为0.50~0.75v/(v·min);
所述重组大肠杆菌的按如下方法构建:以E.coli KXW3009为宿主细胞,以pRSFDuet为载体,过表达来自于真养产碱杆菌的编码核苷酸序列如GenBank:MH558939.1所示的phbCAB基因,所述pRSFDuet载体上连接有核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的tac启动子。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述发酵培养基和种子培养基的pH为7.0。
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