[发明专利]一株对水产病原菌有广谱拮抗作用的嗜酸乳杆菌及其应用

说明书

本发明公开了一株高效广谱抑菌的嗜酸乳杆菌及其应用。该嗜酸乳杆菌命名为：嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)SSRG1‑2，保藏号为GDMCC 60903。该嗜酸乳杆菌SSRG1‑2具有良好的抑菌效果；在盐浓度为0.5％的培养基中，该菌株的生长最好，培养39h后菌液OD₆₀₀值接近1.0；菌株SSRG1‑2对常见水产病原菌具有高效抑能力，在室内石斑鱼养殖攻毒试验中，显示出了很好的抗病性，且抑菌物质主要为蛋白类和非蛋白类复合物质，用于防治病原菌不会产生耐药性、无二次污染，在水产养殖病害防治中有较大的应用潜力。

技术领域

本发明涉及水产微生物应用技术领域，具体涉及一株嗜酸乳杆菌及其在水产养殖防治病原菌中的应用。

背景技术

我国是世界第一大水产养殖大国，养殖产量约占世界水产养殖总产量的70％。但随着我国水产养殖规模的逐步扩大及集约化程度的不断提高，养殖过程饵料残留、排泄物累积等造成水产养殖水质不断恶化，水产养殖行业病害加剧，其中气单胞菌、弧菌等多种水产养殖常见病原菌，常常造成水产养殖动物相关病害的大规模暴发，给蓬勃发展的水产养殖业带来巨大损失，极大地限制了我国水产养殖业健康可持续发展。

目前，广谱抑菌抗生素广泛应用在防治迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)等常见水产病原菌上，这不仅导致了一些“超级细菌”的出现，而且其在抑制病原菌的同时也杀灭了益生微生物，对养殖动物机体微生态平衡造成了严重破坏，其自身免疫水平反而会出现下降，易再次感染爆发疾病。

乳酸菌是人和动物肠道普遍存在的正常微生物，有调节免疫力、维持肠道内生态平衡等作用，具有良好的潜在益生性，目前关于其对病原菌防治研究主要在食品中，其作为一种新型生物防腐剂备受关注。但在水产养殖病害防治上研究很少。

但目前商品化的乳酸菌细菌素仅限于pediocin PA-1和Nisin等少数几种，原因在于许多乳酸菌细菌素pH范围窄、热不稳定、抑菌谱窄或产量相对较低，在食品中的应用受限。而抗菌类的乳酸菌在水产养殖中应用来抗菌防病的更少，因此，分离筛选具有高效广谱抑水产病原菌能力的乳酸菌菌株并将其应用于水产养殖中，对于水产养殖业逐步实现少抗到无抗养殖具有重要实际意义。

发明内容

本发明的目的提供一株对水产病原菌有广谱拮抗作用的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)SSRG1-2，为水产养殖病原菌防治提供了一种良好的生物材料。

为实现上述目的，本发明公开了一株高效广谱拮抗病原菌嗜酸乳杆菌，其为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)SSRG1-2，该菌株已保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址为广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCCNo：60903，保藏日期为2019年12月25日。

本发明的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)SSRG1-2是由发明人于2019年10月从鱼肠道中分离得到，该菌株生理生化特征为：革兰氏阳性菌，细胞形状为短杆状，大小为0.5～1.0×1.5～2.0μm(见图1)；菌落呈白色、表面光滑。可在盐度为3％的条件下旺盛生长。

提取上述喜盐抑菌嗜酸乳杆菌SSRG1-2的基因组DNA，利用27F/1492R引物扩增其16S rDNA基因，测序后得到的基因序列见SEQ ID NO.1。将该序列在NCBI及EzBioCloud网站上进行同源性比对分析、构建系统发育树，并结合形态学观察，结果表明，该菌株为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)。

本发明的第二个目的是提供嗜酸乳杆菌SSRG1-2在制备水产养殖中防治病原菌药物中的应用。