[发明专利]一种血浆circRNA标志物及其应用

说明书

本发明属于生物及分子诊断技术领域，公开了一种血浆circRNA标志物及其应用。标志物为hsa_circ_000613，所述血浆circRNA标志物序列如SEQ ID NO：1所示。本发明首次发现血浆中存在hsa_circ_000613以及其对于胃癌诊断的价值。提供的血浆circRNA提取方法和试剂盒，能够从血液样本中方便、准确地提取和检测血浆circRNA，有利于实验室及临床血浆circRNA的研究和应用。本发明提供的hsa_circ_000613检测方法和试剂盒，可以用于快速检测hsa_circ_000613在内的多种circRNA。

技术领域

本发明属于生物及分子诊断技术领域，尤其涉及一种血浆circRNA标志物及其应用。

背景技术

胃癌是具有高发生率和死亡率的恶性肿瘤。由于起病隐匿，早期无特征性的临床症状，大多数病人确诊时已是中晚期，预后较差。因此实现胃癌早期诊断对提高病患生存率尤为重要。目前组织活检是胃癌的确诊金标准，具有明显创伤性和滞后性，治疗上以手术切除和放化疗为主，具有局限性及药物副作用。因此，急需开发一种方便、微创、灵敏和特异的诊断方法用于胃癌诊断尤其是早期诊断。

血浆是临床检验中的重要样本之一，因其与所有组织器官都有接触，能携带有关机体的大量实时有效信息，且采样方式简单、样本易获取，可通过检测血浆携带的蛋白质、核酸、脂质等分子诊断和监测多种疾病。circRNA是一种具有共价闭合环状结构的新型非编码RNA。由于其种类和数量丰富、稳定性和保守性高、在各种组织细胞和人体体液中广泛分布、具有疾病特异性以及组织和发展阶段特异性，参与肿瘤的增殖、凋亡、迁移和侵袭等多种生理和病理过程的生物调控，是具前景的新型肿瘤分子标志物。有研究显示血浆中circRNA稳定且丰富，但血浆circRNA能否作为胃癌诊断标志物以及如何建立成熟检测方法尚不清楚。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：

(1)目前针对胃癌血浆circRNA标志物的分析报道较少，大多对胃癌组织中circRNA表达水平进行分析，血浆circRNA是否可作为胃癌诊断标志物尚不清楚。

(2)对于血浆circRNA的提取和检测方法目前较为单一，大多利用trizol LS法联合RT-qPCR进行提取和检测，该方法应用于血浆circRNA提取难以保证其浓度、纯度和操作简便性。

解决以上问题及缺陷的难度为：目前，急需开发针对胃癌诊断的血浆circRNA，以及简便的提取和检测血浆circRNA方法，既能保证提取的浓度和纯度较好，又能保证检测的准确性。

解决以上问题及缺陷的意义为：能为胃癌诊断提供新的潜在血浆circRNA标志物和临床实验室检测方法，也能为发掘和分析更多血浆circRNA应用于肿瘤标志物提供帮助。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种血浆circRNA标志物及其应用。

本发明是这样实现的，一种血浆circRNA标志物，所述血浆circRNA标志物为hsa_circ_000613，所述血浆circRNA标志物序列如SEQ ID NO：1所示。

本发明的另一目的在于提供一种所述血浆circRNA标志物作为胃癌检测的标志物的应用。

本发明的另一目的在于提供一种所述血浆circRNA标志物在制备用于检测胃癌的芯片、制剂或试剂盒中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种包括含所述血浆circRNA标志物的芯片、制剂或试剂盒。

进一步，所述试剂盒为胃癌检测试剂盒，所述试剂盒可测定血浆hsa_circ_000613含量。

进一步，所述试剂盒包含检测hsa_circ_000613含量的PCR引物，引物序列如SEQID NO：2和SEQ ID NO：3所示。