[发明专利]一种癌胚抗原CEA的检测试剂盒

说明书

本发明涉及医学检测领域，公开了一种癌胚抗原CEA的检测试剂盒。本发明试剂盒包括试剂R1和试剂R2；所述试剂R2为包被癌胚抗体的胶乳试剂，所述包被癌胚抗体的胶乳试剂由包括三乙醇胺和干酪素的封闭剂封闭制得。实验表明，本发明利用三乙醇胺和干酪素封闭制备包被癌胚抗体的胶乳试剂，有效地提高了检测灵敏度和试剂盒的稳定性。

技术领域

本发明涉及医学检测领域，具体涉及一种癌胚抗原CEA的检测试剂盒。

背景技术

癌胚抗原CEA是一种分子量为180～200kDa的多糖蛋白复合物,主要存在于直肠,结肠癌组织和胚胎肠粘膜上；因这种抗原也存在于2～6个月胚胎的胃肠、肝脏和胰腺组织中,故名癌胚抗原。CEA在多种肿瘤中表达，是一个广谱性肿瘤标志物,目前在临床主要用辅助恶性肿瘤的诊断、判断肿瘤分期和病变程度、监测治疗和预报复发等。

目前，检测CEA的方法较多，包括酶联免疫法(ELISA)、化学发光(CLIA)免疫分析法、胶乳免疫比浊法等。采用酶联免疫法检测癌胚抗原的主要缺点是检测过程中需要手动操作，耗时长，结果重现性较差；采用化学发光法检测癌胚抗原准确性和可重复性都较好，但试剂成本相对较高；目前胶乳免疫比浊法具有操作简单，测定结果快速准确，成本较低，对疾病的早期诊断和治疗具有重要意义；但癌胚抗原胶乳免疫比浊试剂监测灵敏度是一大难题。

根据健康人群体检数据，血清中CEA含量一般在5ng/mL以下，因此在保证试剂线性范围的基础上，增加胶乳试剂的灵敏度是非常有必要的，否则临床检验时会出现较多的假阳性样本的问题，干扰临床诊断。因此，目前亟需研发一种灵敏度高、稳定性较好、方便快捷、成本较低，可在全自动生化分析仪上使用的癌胚抗原检测试剂盒。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种癌胚抗原CEA的检测试剂盒，使得所述试剂盒能够具有灵敏度高、稳定性好的优点。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种癌胚抗原CEA的检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2；

本发明检测试剂盒在试剂R2制备过程中同时利用三乙醇胺和干酪素进行封闭，三乙醇胺的化学结构式为C₆H₁₅NO₃，干酪素的化学结构式为NH₂RCOOH，三乙醇胺结构中含有3个羟基，其羟基可与胶乳颗粒上未被抗体完全结合的活化羧基及环氧基结合，使颗粒表面更具有亲水性，从而防止生物由来物质的吸附，有效地降低非特异性反应，提高了检测灵敏度；同时，干酪素有利于与胶乳颗粒结合后的抗体的立体构造和/或其方向的稳定性，进而改善抗体结合胶乳颗粒后性能的稳定。实验表明，本发明检测试剂盒具有更高的灵敏度和稳定性。

一些实施方案中，本发明检测试剂盒中，三乙醇胺的工作浓度以质量百分数计为5-10％，干酪素的工作浓度以质量百分数计为5-10％。一些具体实施例中，三乙醇胺的工作浓度以质量百分数计为10％，干酪素的工作浓度以质量百分数计为10％。

一些实施方案中，所述试剂R2由如下步骤制得：

步骤1：将胶乳颗粒稀释、活化，加入癌胚抗体进行偶联，得混合液；

步骤2：向所述混合液中加入封闭剂封闭30min-60min，离心，得沉淀物；

步骤3：向所述沉淀物中加入R2稀释液重悬，经超声分散、老化，获得试剂R2；

所述封闭剂包括三乙醇胺和干酪素。

一些实施方案中，步骤1中，所述稀释具体为：用10-50mM，pH为5.0-10.0的包被缓冲液进行稀释。其中，包被缓冲液的pH优选为6.0-8.0。包被缓冲液选自磷酸盐缓冲液、HEPES缓冲液、MES缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或几种。

一些具体实施例中，步骤1中，所述稀释具体为：用50mMpH7.0的MOPS缓冲液稀释。