[发明专利]鲍氏桑黄孔菌、其发酵产物的制备方法及应用在审
申请号: | 202011486373.6 | 申请日: | 2020-12-16 |
公开(公告)号: | CN112574893A | 公开(公告)日: | 2021-03-30 |
发明(设计)人: | 李向敏;吴清平;阮勤钊;卓丽君;陈晓光;谢意珍;王落琳;彭娟娟;胡惠萍;刘远超;蔡曼君;肖春;陈少丹;高雄 | 申请(专利权)人: | 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P1/02;A61K36/07;A61P35/00;C12R1/645 |
代理公司: | 广州弘邦专利商标事务所有限公司 44236 | 代理人: | 程长文 |
地址: | 510070 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鲍氏桑黄孔菌 发酵 产物 制备 方法 应用 | ||
1.鲍氏桑黄孔菌,其特征在于,其分类命名为Sanghuangporus baumii HMGIM-D150705,保藏编号为GDMCC NO:61307。
2.如权利要求1所述的鲍氏桑黄孔菌的发酵产物提取物在制备抗癌细胞生长的药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述发酵产物提取物为发酵产物的乙酸乙酯提取物。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述癌细胞为三阴性恶性乳腺癌细胞。
5.一种制备如权利要求2~4任一项所述鲍氏桑黄孔菌的发酵产物的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)菌株分离
将分离母种培养基中的各成分分装到第一试管中,将第一试管经0.11MPa大气压、121℃高温湿热灭菌20-30min,冷却后摆成斜面;将鲍氏桑黄孔菌的子实体在无菌条件下用75%酒精擦拭表面后撕开,以无菌操作方式取0.2-0.5mm×0.2-0.5mm的内部菌肉组织接入第一试管中;接入后将第一试管置于25℃培养箱中恒温暗培养10-15d,待菌丝长满斜面后进行下一步转接;
(2)菌株纯化
将纯化母种培养基中的各成分分装到第二试管中,将第二试管经0.11MPa大气压、121℃高温湿热灭菌20-30min,将经过分离后感染细菌的菌种转接到第二试管中,将第二试管置于25℃培养箱中恒温暗培养,待菌丝生长而细菌尚未生长时进行菌丝的挑取与下一步转接;
(3)固体发酵
采用菌种袋装入固体发酵培养基,在0.11MPa大气压、121℃高温湿热环境中灭菌20-30min,将固体发酵培养基取出冷却,以无菌操作的方式接入分离纯化成功的菌种;之后将固体发酵培养基置于25℃培养箱中恒温暗培养,保持二氧化碳浓度为4000ppm以下、湿度为50-60%,培养时间为35-55d。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,按重量百分比计,所述分离母种培养基中各成分为:马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂2%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.15%、维生素B10.0008%-0.0012%、蚕蛹粉0.5%,余量为蒸馏水。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,按重量百分比计,所述纯化母种培养基中各成分为:蛋白胨0.5%、葡萄糖1%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、琼脂2%、1/3000孟加拉红溶液10%、氯霉素0.01%,余量为蒸馏水。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述固体发酵培养基中各成分为:大米50g、蒸馏水50mL。
9.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述菌种袋为聚丙烯菌种袋,其长度为15cm,宽度为30cm,厚度为5丝米。
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