[发明专利]一种单胺氧化酶B(MAO-B)抑制剂及其应用

说明书

本发明涉及尼古丁(Nicotine，又名烟碱)作为单胺氧化酶B(MAO‑B)抑制剂及其应用，属于神经生物学领域。本发明通过Docking理论模拟证明尼古丁具有与MAO‑B活性空腔结合的潜力，通过Amplex Red探针检测荧光法验证了尼古丁在体外对MAO‑B纯蛋白的抑制作用。基于尼古丁可作为MAO‑B抑制剂的作用，将其用于过表达MAO‑B的神经细胞系和帕金森疾病果蝇模型的治疗中，得到保护效果。尼古丁作为一种MAO‑B抑制剂，可用于其对抗帕金森疾病、用于治疗和预防可通过单胺氧化酶B抑制剂进行调节的疾病。

技术领域

本发明涉及尼古丁(Nicotine)可以作为一种MAO-B抑制剂，更具体地，本发明涉及尼古丁作为MAO-B抑制剂可用于对抗帕金森疾病的应用潜力。

背景技术

单胺氧化酶-B(Monoamine Oxidase B,MAO-B)是机体内降解多巴胺的关键酶，该蛋白位于线粒体膜上，其辅酶FAD的活性中心的半胱氨酸残基可以与多巴胺产生反应最终产生醛类和双氧水。MAO-B的过表达或活性增加是帕金森疾病(PD)发病的重要因素，脑组织中所含MAO-B活性增加是脑功能衰退指标之一。因此MAO-B抑制剂(如Pargyline、Resagyline等)被用作治疗帕金森疾病的常用药物。

已有大量研究表明，尼古丁具有对抗PD的作用。目前主要的观点认为，尼古丁是通过结合烟碱型乙酰胆碱受体发挥其作用，主要的分子通路为尼古丁结合到受体后，激活细胞内钙离子释放，后者又激活下游的众多信号分子，包括蛋白激酶A(PKA)、细胞分裂原活化蛋白激酶(ERK)、钙调蛋白(CaM)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)等，从而减少了神经元的凋亡，起到对多巴胺神经元的保护作用。

但目前，尼古丁作为MAO-B抑制剂仍未被报道。因此其作为MAO-B抑制剂的作用可补充说明尼古丁对抗PD的分子机制。

发明内容

本发明提出了尼古丁作为一种MAO-B抑制剂，可用于其对抗帕金森疾病、用于治疗和预防可通过单胺氧化酶B抑制剂进行调节的疾病。

本发明解决的技术问题是：在体外检测尼古丁对MAO-B蛋白的活性抑制率，并且在细胞和果蝇实验中对其作为MAO-B抑制剂产生的对抗PD的效果进行初步验证。

为了解决上述技术问题，本发明提出的技术方案是：一种单胺氧化酶B(MAO-B)抑制剂，为尼古丁(Nicotine，又名烟碱)，其结构式如下式1。

优选的，包括活性成分为式1所示的尼古丁，以及药学上可接收的药用辅料。

优选的，包括活性成分为式(1)所示的尼古丁，以及药学上可接受的载体制备成片剂、胶囊剂、注射剂、粉针剂、颗粒剂、脂肪乳剂、微囊、滴丸、软膏剂或透皮控释贴剂剂型的药物。

优选的，尼古丁具有抑制MAO-B蛋白活性的作用，通过体外小分子-蛋白对接Docking理论模型计算模拟得出尼古丁具有与MAO-B活性空腔结合的可能性，尼古丁分子可以进入MAO-B蛋白的活性空腔，其活性N位点可以接近MAO-B蛋白辅酶FAD的活性位点。

优选的，1μM浓度下尼古丁即可用于保护神经细胞SH-SY5Y由于过表达MAO-B造成的神经毒性易感性，并可影响细胞代谢和凋亡相关因子的变化。

尼古丁细胞给药后0.5h即可到达线粒体，且线粒体中尼古丁含量在6h内保持稳定。本发明首次报道尼古丁细胞给药后可以到达线粒体，区别于尼古丁关于对抗帕金森症的基于细胞膜上受体作用的现有研究结果，可补充完善尼古丁的作用机制。

为了解决上述技术问题，本发明提出的技术方案是：所述的单胺氧化酶B(MAO-B)抑制剂的应用，可用于制备用于治疗和预防可通过单胺氧化酶B抑制剂进行调节的疾病中药物的制备。

优选的，可用于治疗帕金森症状药物的制备。