[发明专利]CD44抗体在制备治疗帕金森疾病的药物中的应用

说明书

本发明公开了一种CD44抗体在制备治疗帕金森疾病的药物中的应用。通过立体定位注射方法，向帕金森模型小鼠皮层部位注射CD44抗体（Anti‑CD44），发现该抗体可以显著缓解PD相关症状，如改善小鼠运动功能、恢复黑质部位多巴胺能神经元数量和抑制神经炎症。本发明效果好，研究方法简便。

技术领域

本发明涉及一种CD44抗体的用途。

背景技术

帕金森病(PD)又称为震颤性麻痹，是一种仅次于阿尔茨海默病的第二大神经退行性疾病。据统计，全世界每800人中就有1人患有帕金森，到2030年，由于老龄化进程的加速，帕金森患病率将翻一番，预计超过900万患者。患者每年的直接医疗费用预计超过10,000美元，对家庭和社会造成了沉重的负担。帕金森临床主要表现为行动迟缓、静止性震颤和动作僵化。其主要病理学特征为黑质部位多巴胺能神经元的减少。脑内产生多巴胺的细胞逐渐丧失了影响神经系统的功能，使患者控制肌肉的能力受到限制。

临床PD的治疗，主要以多巴胺替代疗法为主，虽然在一定程度上能够改善PD患者的症状，但长期使用该疗法可引起多种不良反应，如不安、失眠、幻觉等精神症状。因此，进一步研究PD发生、发展的机制，寻找潜在治疗PD的靶点具有十分重要的科学意义和应用价值。目前，PD发病机制仍然不清楚，可能与蛋白质的异常积聚、炎症反应、线粒体功能紊乱和氧化应激有关。近年来，神经炎症作为帕金森病发病机制的重要切入点之一受到广泛关注。

CD44是一种细胞粘附分子，是透明质酸的主要受体，也是细胞外基质的主要成分，其在内皮细胞、造血干细胞、间充质细胞以及肿瘤细胞表面均有表达。CD44主要参与异质性粘附，即肿瘤细胞与宿主细胞和宿主基质的粘附，异质性粘附在肿瘤细胞侵袭转移中起促进作用。此外，CD44还充当TLR4的共受体传导的炎症调节剂来调节Toll样受体(TLR)的激活。

发明内容

本发明的目的在于提供一种效果好的CD44抗体在制备治疗帕金森疾病的药物中的应用。

本发明的技术解决方案是：

一种CD44抗体在制备治疗帕金森疾病的药物中的应用。

是在制备通过缓解运动功能障碍、改善MPTP所诱导的嗅觉功能障碍、提高TH的表达来治疗帕金森疾病的药物中的应用。

一种研究CD44抗体治疗帕金森疾病作用机制的方法，其特征是：包括下列步骤：

(1)抗体注射

用75mg/kg苯巴比妥麻醉3月龄的B6野生型小鼠，通过立体定位进行单侧脑内注射，部位是在相对于前卤的前后正位AP 0mm和中外侧ML-2mm以及距硬脑膜表面的背腹DV-1.5mm；使用10μL微量注射器将1μL 1mg/ml的Anti-CD44以200nl/min的速率注射至小鼠脑皮层部位；对照小鼠以同样方法注射同等剂量的免疫球蛋白G；注射结束后，将针头保持在原部位3分钟保证吸收，再从小鼠大脑中缓慢移出针头，缝合头皮；

(2)帕金森动物模型制备

在立体定位注射后10天，用腹腔注射神经毒素MPTP方法诱导PD模型小鼠；在给药前三天，每天对小鼠进行转棒，爬杆一系列的行为学训练；分别将注射IgG和Anti-CD44的小鼠分为两组，一组为生理盐水组，另一组为MPTP组；接着对其行20mg/kg/d MPTP造模，连续注射一周，再进行行为学评估；与注射同等体积的生理盐水的对照小鼠相比，运动功能具有显著障碍的小鼠被认为是造模成功的PD模型小鼠，用于后续实验；

(3)转棒实验

使用加速旋转式旋仪进行转棒测试，用以检测运动协调性；将小鼠放在转棒上，4-40rpm加速模式持续5分钟，记录跌落前在转棒上保持平衡并连续运动的时间；重复三次，取平均值；

(4)悬尾实验