[发明专利]一种利用超景深显微镜观察皮革中弹性纤维的方法

权利要求书

1.一种利用超景深显微镜观察皮革中弹性纤维的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）冷冻切片：取待观测皮革样品在冷台上冷冻处理2~4 h，冷冻结束后对样品进行切片，备用；

（2）染色：将步骤（1）中的切片置于0.4-0.6%高锰酸钾氧化液中处理5~20min，水洗3~5次，置于1.5-3%的草酸溶液中漂白2~10min，水洗3~5次，醇洗3~5次，然后置于含有染色液中染色5~30 min，醇洗染色后的切片至无紫色染液脱出，水洗切片3~5次，使用无水乙醇做脱水处理，最后将切片置于二甲苯溶液中透明处理5-15min，吸取切片表面残留的二甲苯溶液至无明显液体渗出；

（3）观察：将步骤（2）染色结束后的切片置于超景深显微镜载物台上，调整细（粗）准焦螺旋来确定合适的拍摄起始位置，拍照结束后沿Z轴对所有的照片进行叠加处理后即可获得观测结果；

步骤（2）中所述的染色液配制方法为：将碱性品红溶于乙醇中，再加三聚乙醛和浓盐酸，混合后于室温放置2-3天得染色液。

2.根据权利要求1所述的观测方法，其特征在于，所述染色液中碱性品红的浓度为0.01g/mL；所述乙醛的加入量为染色液体积的1%；所述的浓盐酸的加入量为染色液体积的1%。

3.根据权利要求1所述的观测方法，其特征在于，所述的乙醇为质量浓度70%的乙醇溶液；所述的浓盐酸浓度为12mol/L。

4.根据权利要求1所述的观测方法，其特征在于，步骤（1）中所述的冷冻处理温度为-20℃，待观测皮革的切片厚度为5~25 μm。

5.根据权利要求1所述的观测方法，其特征在于，步骤（2）染色中醇洗使用的溶剂为70%乙醇溶液。

6.根据权利要求1所述的观测方法，其特征在于，步骤（3）中超景深显微镜放大倍数为1000倍。