[发明专利]细胞冻存剂及细胞的冻存方法有效

专利信息
申请号: 202011491145.8 申请日: 2020-12-16
公开(公告)号: CN112544611B 公开(公告)日: 2021-10-29
发明(设计)人: 徐洪杰;吴迪;秦大江 申请(专利权)人: 生物岛实验室
主分类号: A01N1/02 分类号: A01N1/02
代理公司: 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 代理人: 林青中
地址: 510300 广东省广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 细胞 冻存剂 方法
【权利要求书】:

1.一种细胞冻存剂,用于冻存间充质干细胞,其特征在于,所述细胞冻存剂不含血清,所述细胞冻存剂包括稳定剂、二甲基亚砜、小分子化合物和基础培养基,所述稳定剂的质量与所述二甲基亚砜的体积和所述小分子化合物的质量以及所述基础培养基的体积之比为(0.5mg~21mg):100μL:(1μg~10μg):(700μL~890μL),所述稳定剂选自甲基纤维素、羟甲基纤维素和羧甲基纤维素中的至少一种,所述小分子化合物为毛喉素、槲皮素、奥替普拉和二甲双胍的混合物,在所述小分子化合物中,毛喉素、槲皮素、奥替普拉和二甲双胍的质量之比为(1~20):(0.1~2):(0.1~4):(0.1~10)。

2.根据权利要求1所述的细胞冻存剂,其特征在于,所述稳定剂的质量与所述二甲基亚砜的体积和所述基础培养基的体积之比为(0.5mg~21mg):100μL:(800μL~890μL)。

3.根据权利要求1所述的细胞冻存剂,其特征在于,在所述小分子化合物中,毛喉素、槲皮素、奥替普拉和二甲双胍的质量之比为(1~10):(0.1~1):(0.1~1):(0.1~1)。

4.根据权利要求1所述的细胞冻存剂,其特征在于,所述稳定剂与所述小分子化合物的质量之比为1:(0.0001~0.01)。

5.根据权利要求1所述的细胞冻存剂,其特征在于,所述细胞冻存剂还包括聚乙烯吡咯烷酮、糖、多元醇和氨基酸中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的细胞冻存剂,其特征在于,所述稳定剂与所述聚乙烯吡咯烷酮的质量之比为1:(4~6)。

7.根据权利要求5所述的细胞冻存剂,其特征在于,所述糖选自葡萄糖、麦芽糖、木糖、海藻糖及蔗糖中的至少一种,所述稳定剂与所述糖的质量之比为1:(1.5~15)。

8.根据权利要求5所述的细胞冻存剂,其特征在于,所述多元醇选自丙二醇及丙三醇中的至少一种;所述稳定剂的质量与所述多元醇的体积之比为1mg:(200μL~500μL)。

9.根据权利要求5所述的细胞冻存剂,其特征在于,所述氨基酸选自脯氨酸、谷氨酰胺、赖氨酸及色氨酸中的至少一种,所述稳定剂与所述氨基酸的质量之比为1:(1.5~15)。

10.根据权利要求1~9任一项所述的细胞冻存剂,其特征在于,所述细胞冻存剂中还包括大豆低聚肽,所述大豆低聚肽的平均分子量小于500Da。

11.根据权利要求10所述的细胞冻存剂,其特征在于,所述稳定剂与所述大豆低聚肽的质量之比为1:(0.0005~0.01)。

12.根据权利要求1~9及11任一项所述的细胞冻存剂,其特征在于,所述基础培养基选自DMEM/F12培养基、MEM培养基及RPIM1640培养基中的一种。

13.一种间充质干细胞的冻存方法,其特征在于,包括以下步骤:

将间充质干细胞与权利要求1~11任一项所述的细胞冻存剂混合后,程序降温。

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