[发明专利]一种寡核苷酸、载体及制备方法和应用有效
| 申请号： | 202011492355.9 | 申请日： | 2020-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN112574991B | 公开（公告）日： | 2023-03-17 |
| 发明（设计）人： | 沈小鹏;张静宜;毕超;朱国萍;王敖;李蒙;刘忠贤;王春光 | 申请（专利权）人： | 安徽师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/10;C12N15/85;A61K31/713;A61P21/00 |
| 代理公司： | 南京匠桥专利代理有限公司 32568 | 代理人： | 陈秀芳 |
| 地址： | 241000 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 寡核苷酸 载体 制备 方法 应用 | ||
1.一种寡核苷酸在制备修复强直性肌营养不良症I型中成肌功能障碍的药物中的应用，其特征在于，所述寡核苷酸的正义链核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，反义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.根据权利要求1所述寡核苷酸在制备修复强直性肌营养不良症I型中成肌功能障碍的药物中的应用，其特征在于，寡核苷酸的制备方法包括如下步骤：
步骤一、选取作用于Postn的mRNA上2063-2085区域的siRNA分子，得到siRNA的正义链序列与反义链序列；
步骤二、将步骤一得到的siRNA的正义链序列与反义链序列置于寡核苷酸模板中，获得寡核苷酸的正义链核苷酸序列和反义链的核苷酸序列；
步骤三、将寡核苷酸的正义链核苷酸序列和反义链的核苷酸序列经退火融合成双链、一次孵育、加入10 mM ATP及10 U/uL T4 Kinase继续二次孵育后得到；
所述步骤一中siRNA的正义链序列如SEQ ID NO.1所示，反义链序列如SEQ ID NO.2所示；
所述步骤三中一次孵育是先将融合成双链的混合体系置于94℃孵育4分钟，之后置于恒温70℃的水浴中孵育10分钟，之后关闭对水浴的加热使水浴逐渐缓慢降温至室温；
所述步骤三中二次孵育是先在37℃孵育60分钟，之后在65℃孵育10分钟。
3.根据权利要求1所述寡核苷酸在制备修复强直性肌营养不良症I型中成肌功能障碍的药物中的应用，其特征在于，所述药物为下调Postn蛋白表达量的药物。
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