[发明专利]一种反应液定量均分、密封和扩增的检测单元在审
申请号: | 202011493090.4 | 申请日: | 2020-12-16 |
公开(公告)号: | CN112481111A | 公开(公告)日: | 2021-03-12 |
发明(设计)人: | 杨柯;朱灵;王全福;朱灿灿;赵俊;汪磊;邓国庆;刘勇 | 申请(专利权)人: | 中国科学院合肥物质科学研究院;合肥中科易康达生物医学有限公司 |
主分类号: | C12M1/34 | 分类号: | C12M1/34;C12M1/24;C12M1/00;C12Q1/6848 |
代理公司: | 北京科迪生专利代理有限责任公司 11251 | 代理人: | 杨学明 |
地址: | 230031 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 反应 定量 均分 密封 扩增 检测 单元 | ||
本发明提出了一种反应液定量均分、密封和扩增的检测单元及其在核酸检测中的应用,该检测单元包括扩增反应液存储腔、若干石蜡密封油存储管以及若干PCR管;所述扩增反应液存储腔通过试剂通道分别与各PCR管相连通,试剂通道上设置有第一液路切换阀;每一PCR管分别通过一PCR管排气通道与石蜡密封油存储管相连通,各PCR管排气通道的端部连接设置有第二液路切换阀;所述扩增反应液存储腔和石蜡密封油存储管上分别设置有外接端口。本发明可以实现单指标或多指标检测,在仅需注射泵提供的正压力,无需借助外界复杂的设备即可实现扩增反应液和石蜡密封油的注入及定量均分,同时可保障了检测过程中及检测结束后各PCR反应容器的相对密闭,避免了扩增试剂体系的挥发和实验室污染。
技术领域
本发明涉及核酸分析检测技技术领域,尤其是涉及一种反应液定量均分、密封和扩增的检测单元。
背景技术
核酸检测过程中常涉及到多个扩增试剂体系配置问题,在精准检测中对检测试剂的加入量要求较高,但在操作过程中常受到人为操作,气泡的影响导致加入的试剂量不够精准;另在PCR反应容器中进行PCR反应期间,使扩增试剂体系在大约30℃的较低温度到大约98℃的较高温度之间重复(例如20-50次)。
为了防止扩增试剂体系由于蒸发或在PCR反应容器的侧壁上冷凝而损失体积,应使用蒸发或冷凝防止剂来密封扩增试剂体系的暴露表面。通常在PCR反应容器上盖上“物理盖”或在扩增试剂体系加入高纯硅油,矿物油或某些其他与扩增试剂体系不混溶的物质来达到密封的目的。
但是这些密封试剂的使用存在某些缺点,尤其是与集成PCR系统结合使用时,集成PCR系统常希望实现“样品进-结果出”的目标,操作人员不可以在进行热循环之前手工对其进行封盖。特别地,当在多个PCR反应容器中进行多重PCR时,自动化且有效的密封就变得尤为重要。
发明内容
本发明提出一种反应液定量均分、密封和扩增的检测单元,以解决背景技术中的技术问题,以无需借助外界复杂的设备即可实现扩增反应液和石蜡密封油的注入及定量均分,同时以保障检测过程中及检测结束后各PCR反应容器的相对密闭,避免扩增试剂体系的挥发和实验室污染,提高分析检测的安全性、准确性、一致性和对外部环境的抗干扰性。
本发明的技术方案是这样实现的:
一种反应液定量均分、密封和扩增的检测单元,包括用于预先包埋扩增反应液的扩增反应液存储腔、用于预先包埋石蜡密封油的若干石蜡密封油存储管以及用于预包埋速溶扩增干粉试剂并使得扩增反应液和石蜡密封油缓慢均分的若干PCR管;所述扩增反应液存储腔通过试剂通道分别与各PCR管相连通,试剂通道上设置有第一液路切换阀;每一PCR管分别通过一PCR管排气通道与石蜡密封油存储管相连通,各PCR管排气通道的端部连接设置有用于进行管道切换的第二液路切换阀;所述扩增反应液存储腔和石蜡密封油存储管上分别设置有外接端口。
进一步优化技术方案,每一石蜡密封油存储管的出口端分别通过一石蜡密封油分样通道连通设置有缓冲管,缓冲管的出口端与第二液路切换阀的进口端连通,缓冲管上设置有第二外接端口。
进一步优化技术方案,每一PCR管与试剂通道之间分别通过一扩增反应液分样通道相连通。
进一步优化技术方案,所述PCR管设置有八个,其中六个PCR管分别作为阳性对照,一个PCR管作为阴性对照,另一个PCR管作为内参对照;所述PCR管排气通道设置有八个。
进一步优化技术方案,所述石蜡密封油存储管设置有八个。
进一步优化技术方案,所述第二液路切换阀共设置有九个切换位置,其中八个切换位置分别与一PCR管排气通道相对应,另一个切换位置为切断位置。
进一步优化技术方案,所述第一液路切换阀包括用于使得试剂通道连通的第一位置和用于使得试剂通道断开的第二位置。
采用了上述技术方案,本发明的有益效果为:
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