[发明专利]一种适合工厂化生产的大花虎刺梅的组培快繁方法

说明书

本发明属于组织培养技术领域，是基于泰国引进的大花虎刺梅新品种进行2年的实验研究和生产基础上总结归纳的适合工厂化生产组培快繁研究方法，可操作性强，完全可用于指导生产。本发明首次建立了一套完整的具有高增殖倍数和生根率的适合工厂化生产的诱导、增殖、生根和炼苗的快繁方法，形成批量快速的繁殖局面，通过控制增殖代数、培养基激素浓度和配比随着代数的变化有所改变，确保种苗的稳定性、活力与增殖系数，提高产量和质量；本发明采用从第7代开始边增殖边生根的生产方式，降低生产成本的同时加快生产进度，保证增殖系数的同时确保出根苗的质量，完全适合大规模工厂化的生产，极大地提高大花虎刺梅繁育的效率。

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，更具体地，涉及一种适合工厂化生产的大花虎刺梅的组培快繁方法。

背景技术

大花虎刺梅(Euphorbia milii)为大戟科大戟属植物，又名铁海棠、麒麟花等。大花虎刺梅茎粗、叶大、花朵繁茂、苞片明艳华丽色彩丰富，一年四季都能开花，花期长，更具有商品性。此外，虎刺梅可入药，具有拔毒、消肿和凉血、止血的作业。国内本土的虎刺梅主要以小花虎刺梅为主，大花虎刺梅花色较少。

目前，大花虎刺梅一般采用扦插的方式进行繁殖，但种苗母株有限，且繁殖系数低、速度慢，难以达到规模化、商品化、标准化的生产。

组织培养技术是目前植物快繁最有效的方法之一，具有繁殖系数高、成苗时间短和便于商品化和产业化生产的优势，且能保持品种的优良性状。目前，少许生产虎刺梅的公司和苗圃已开始利用组织培养技术进行小规模生产，快速繁殖出能够保持性状植株。

现有技术中关于大花虎刺梅的组培研究报道主要是针对单一品种进行组培快繁研究，且通过采用虎刺梅的子房、嫩叶或花瓣先诱导愈伤、再诱导丛芽的方式进行，容易导致组培苗变异。而关于适合工厂化的大花虎刺梅组培快繁的系统研究。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术存在的上述技术缺陷，提供一种适合工业化生产的大花虎刺梅组培快繁方法，该方法能够批量快速的繁殖大花虎刺梅种苗，适应大规模种苗生产，满足市场需求。

本发明的目的通过以下技术方案予以实现：

一种适合工厂化生产的大花虎刺梅的组培培养基，其特征在于，包括芽诱导培养基、增殖培养基、生根培养基；

所述芽诱导培养基为基础培养基+2.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA；

所述增殖培养基包括增殖培养基A、增殖培养基B和增殖培养基C，其中增殖培养基A为基础培养基+1.5mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA，增殖培养基B为基础培养基+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA，增殖培养基C为营养培养基1+0.5mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA；

所述生根培养基为营养培养基2+0.4mg/L IBA+0.02mg/L NAA。

其中，所述基础培养基的组成为：MS培养基添加蔗糖、卡拉胶；所述营养培养基1的组成为：MS培养基，添加蛋白胨、花宝2号、蔗糖、琼脂；所述营养培养基2的组成为：MS培养基，添加活性炭、蔗糖、琼脂。

本发明明确了大花虎刺梅工厂化生产控制的代数，优化了每个培养阶段所用培养基的组分含量和培养时间，生产上完全可以采用边增殖和边生根的方式培养。发明人经过大量实验研究发现，整个生产过程中从芽诱导诱导到最后一代增殖培养阶段所用激素是递减的，且每一阶段培养的代数范围也会对生产量和成本影响较大：芽诱导(0代)——增殖培养阶段I(第1-2代)——增殖培养阶段Ⅱ(第3-7代)——增殖培养阶段Ⅲ(7-13代)——生根培养(第7代可开始)。

本发明还提供一种适合工厂化生产的大花虎刺梅的组培快繁方法，包括以下步骤：

S1、芽诱导培养：以大花虎刺梅半张开的花朵为外植体，消毒后接种于芽诱导培养基中进行芽体诱导；