[发明专利]一种用于治疗肠炎的间充质干细胞及其制备方法

说明书

本发明提供了一种用于治疗肠炎的间充质干细胞及其制备方法，在培养间充质干细胞的过程中通过添加上皮细胞生长因子，血管内皮细胞生长因子，前列腺素E2提高间充质干细胞的组织修复能力，在培养间充质干细胞过程中通过添加成纤维细胞生长因子，血小板衍生生长因子B，前列腺素E2提高间充质干细胞的免疫调控能力。本发明中采用阶段性加入细胞因子可有效的增强间充质干细胞的组织修复能力，并可有效提高间充质干细胞的免疫调控能力。采用组合因子诱导的间充质干细胞进行肠炎的治疗，这种方法简单经济，易于产业化操作，易于向临床转化应用。

技术领域

本发明属于软骨细胞培养领域，尤其涉及一种用于治疗肠炎的间充质干细胞及其制备方法。

背景技术

间充质干细胞是一类具有自我更新、增殖和多向分化潜能的干细胞，广泛存在于脐带、骨髓、牙髓、脂肪或胎盘组织中，具有易于采集、保存和运输、无异体排斥、避免伦理争议、刺激组织再生、调节免疫功能等诸多优点。

结肠炎的治疗药物主要聚集在中药，益生菌类的药物，这些药物的主要作用在于调节胃肠菌群等作用抑制炎症，但对于重症炎症的治疗效果甚微，且未从根本上提高机体的抗炎能力。目前，间充质干细胞在软骨再生、脑缺血性疾病、糖尿病、类风湿性关节炎等动物模型和临床研究中有良好的治疗效果，显示出广阔的应用前景。此外，间充质干细胞在治疗结肠炎具有一定的效果，但是其在重症结肠炎的治疗方面，在抗炎及调节机体免疫功能方面效果甚微。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种用于治疗肠炎的间充质干细胞及其制备方法。

为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：

本发明提供一种用于治疗肠炎的间充质干细胞，所述间充质干细胞为经组合因子诱导培养的间充质干细胞，所述组合因子包括成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子B、上皮细胞生长因子或血管内皮细胞生长因子。

本发明提供一种用于治疗肠炎的间充质干细胞，所述间充质干细胞为经组合因子诱导培养的间充质干细胞，所述组合因子包括成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子B、上皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子、前列腺素E或前列腺素E2。

本发明提供一种用于治疗肠炎的间充质干细胞制剂，包括上述间充质干细胞和辅助成分，所述辅助成分包括药学上接受的辅料、载体和添加剂中的至少一种。

本发明提供一种用于治疗肠炎的间充质干细胞的制备方法，包括如下步骤：

（1）取P1代间充质干细胞，加入添加成纤维细胞生长因子和血小板衍生生长因子B的培养液中进行培养；

（2）培养获得P2代间充质干细胞，加入添加成纤维细胞生长因子和血小板衍生生长因子B的培养液中进行培养；

（3）培养获得P3代间充质干细胞，加入添加上皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子和前列腺素E2的培养液中进行培养；

（4）培养获得P4代间充质干细胞，加入培养液中进行培养；

（5）待细胞生长至融合度达到80%时，消化细胞，离心后获得P5代间充质干细胞。

优选地，步骤（4）为培养获得P4代间充质干细胞，步骤（4）为培养获得P4代间充质干细胞，加入添加成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子B和前列腺素E的培养液中进行培养。

在细胞扩增的P1-P3代间充质干细胞的培养过程中，通过在培养液中添加成纤维细胞生长因子，血小板衍生生长因子B提高细胞的干性。

在细胞扩增的P4代间充质干细胞的培养过程中，通过在培养液中添加上皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子、前列腺素E2，可提高间充质干细胞的组织修复能力。

在细胞扩增的P5代间充质干细胞的培养过程中，通过在培养液中添加成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子B、前列腺素E，可提高间充质干细胞的免疫调控能力。