[发明专利]一种制备高油酸的大豆的方法

权利要求书

1.一种对出发植物中GmFAD2-1B基因进行基因编辑的方法，包括如下步骤：用CRISPR/Cas9系统对出发植物中的GmFAD2-1B基因进行基因编辑，且使所述GmFAD2-1B基因发生突变导致翻译蛋白提前终止，得到转基因植物，实现出发植物中GmFAD2-1B基因的基因编辑；

所述GmFAD2-1B基因是如下(a1)或(a2)或(a3)的DNA分子：

(a1)编码区如序列表中序列1所示的DNA分子；

(a2)在严格条件下与(b1)或(b2)限定的DNA分子杂交且编码所述蛋白质的DNA分子；

(a3)来源于大豆且与(b1)或(b2)限定的DNA分子至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码所述蛋白质的DNA分子；

所述CRISPR/Cas9系统基因编辑的靶点为序列1第2122-2144位或对应序列1第2122-2144位。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述CRISPR/Cas9系统包括如下1)或2)：

1)sgRNA，

所述sgRNA的靶序列为序列1第2122-2144位或对应序列1第2122-2144位；

2)表达所述sgRNA的CRISPR/Cas9载体。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：

所述基因编辑为将所述CRISPR/Cas9载体导入所述出发植物中。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述植物为单子叶植物或双子叶植物。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：

所述使GmFAD2-1B基因发生突变导致翻译蛋白提前终止的突变形式如下：

1)将序列表中序列1第2128-2134位缺失，且保持其他核苷酸残基不变；

或对应于序列表中序列1第2128-2134位缺失，且保持其他核苷酸残基不变；

2)将序列表中序列1第2127-2128位中间插入一个碱基T，且保持其他核苷酸残基不变；

或对应于序列表中序列1第2127-2128位中间插入一个碱基T，且保持其他核苷酸残基不变；

3)将序列表中序列1第2129-2132位缺失，且保持其他核苷酸残基不变；

或对应于序列表中序列1第2129-2132位缺失，且保持其他核苷酸残基不变；

4)将序列表中序列1第2129-2133位缺失，且保持其他核苷酸残基不变；

或对应于序列表中序列1第2129-2133位缺失，且保持其他核苷酸残基不变；

5)将序列表中序列1第2127-2143位缺失，且保持其他核苷酸残基不变；

或对应于序列表中序列1第2127-2143位缺失，且保持其他核苷酸残基不变。

6.一种制备油酸含量高的目的植物的方法，包括如下步骤：

1)权利要求1-5中任一所述的方法，得到转基因植物；

2)将所述转基因植物自交，得到纯合植物，即为目的植物；

所述目的植物的油酸含量高于所述出发植物。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

所述目的植物籽粒的油酸含量高于所述出发植物籽粒的油酸含量。

8.一种用于提高植物油酸含量的物质，为用于基因编辑GmFAD2-1B基因的CRISPR/Cas9系统；

所述CRISPR/Cas9系统基因编辑的靶点为序列1第2122-2144位或对应序列1第2122-2144位。