[发明专利]基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法在审
申请号: | 202011500943.2 | 申请日: | 2020-12-18 |
公开(公告)号: | CN112481198A | 公开(公告)日: | 2021-03-12 |
发明(设计)人: | 李军;王占海;鲁斌;陈德荐;顾盼;商锐 | 申请(专利权)人: | 宁波市博坤生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076 |
代理公司: | 吉林大华铭仁律师事务所 22208 | 代理人: | 申基成;冉玮 |
地址: | 315504 浙江省宁波市奉化*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 修饰 实现 混合 斑检材 精子 细胞 分离 方法 | ||
1.一种基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)采用聚肽对膜进行修饰获得聚肽修饰膜;
(2)将待分离的混合斑检材的分散液或经上皮细胞消化液消化的消化产物和所述聚肽修饰膜混合吸附;
(3)弃去残余溶液,并洗涤所述聚肽修饰膜,获得表面富集男性精子细胞的所述聚肽修饰膜。
2.如权利要求1所述的基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法,其特征在于,在所述步骤(1)中,所述聚肽的肽链结构单元包含的氨基酸残基为赖氨酸、精氨酸、组氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、酪氨酸中的一种或几种。
3.如权利要求1所述的基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法,其特征在于,在所述步骤(1)中,所述修饰为物理修饰或共价修饰。
4.如权利要求1所述的基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法,其特征在于,在所述步骤(1)中,所述膜是聚乙烯膜、聚丙烯膜、聚氯乙烯膜、聚苯乙烯膜、聚酰胺类膜、聚碳酸酯膜、聚甲醛膜、聚酯类膜、聚苯醚膜、聚甲基丙烯酸甲酯膜、聚氨酯膜、聚塑料类膜、聚四氟乙烯膜、乙烯-四氟乙烯共聚物膜、聚苯硫醚膜、聚砜膜、聚酰亚胺膜、尼龙膜、羧甲基纤维素膜、硝酸纤维素膜或丙酸纤维素膜。
5.如权利要求1所述的基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法,其特征在于,在所述步骤(1)中,所述膜负载在耗材上或者所述膜是所述耗材的一部分。
6.如权利要求5所述的基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法,其特征在于,在所述步骤(1)中,所述耗材是管、孔、沟槽或板。
7.如权利要求1所述的基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,所述弃去残余溶液通过施加外力实现。
8.如权利要求7所述的基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,所述外力是水平或垂直方向上施加的力。
9.如权利要求1所述的基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,所述洗涤所述聚肽修饰膜采用缓冲液实现。
10.如权利要求9所述的基于聚肽修饰膜实现混合斑检材精子细胞分离的方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,所述缓冲液包含氯化锂、溴化锂、氯化钠、溴化钠、氯化钾、溴化钾、氯化铯、溴化铯、碳酸钠、碳酸钾、三羟甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸二钠、氯化胍、硫氰酸胍、硫氰酸钾、乙醇、异丙醇、乙二醇、N,N-二甲基甲酰胺、甘露醇、葡萄糖、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、月桂酰基肌氨酸钠、磷酸酰胆碱和甜菜碱中的一种或几种。
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