[发明专利]检测人生长分化因子-15的荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种检测人生长分化因子‑15的荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用，所述的试纸条包括底板以及依次设在所述底板上的加样垫、结合垫、检测垫以及吸水垫，所述结合垫上包载有标记鼠抗人生长分化因子‑15单克隆抗体的免疫荧光微球以及标记兔IgG的免疫荧光微球，所述的检测线上包被有鼠抗人生长分化因子‑15单克隆捕获抗体，所述的质检线上包被有羊抗兔IgG多抗。本发明通过对制备方法进行改进，改善了试纸条在采用荧光定量法检测人生长分化因子‑15中的灵敏度和重复性，为人生长分化因子15的检测提供了新的技术手段。

技术领域

本发明涉及一种荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用，特别涉及一种用于检测人生长分化因子-15的荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用。本发明属于医药技术领域。

背景技术

生长分化因子-15(growth differentiation factor-15，GDF15)属生长分化因子(GDFs)家族，是转化生长因子-β(transforming growth factor B，TGF—B)超家族成员之一。研究显示，人GDF15基因序列位于19p13.1—13.2，包含924个碱基对，由2个外显子和1个内含子构成，并被其内含子分隔开来。GDF15的基因首先转录翻译成308个氨基酸残基的多肽，最终形成包含224个氨基酸残基的GDF15成熟蛋白。

一般情况下GDF15仅在胎盘和前列腺中高表达，而在心脏、其他器官、组织中表达量很少，但在在肿瘤、妊娠、神经元损伤及骨骼肌发育异常等多种疾病状态下增高，并且还参与心血管疾病的演变过程。研究表明血清中GDF15的浓度与多种心血管不良事件密切相关，对心力衰竭、急性心肌梗死、急性冠脉综合征等疾病的早期预测和预后风险提示有较高的价值，是为数不多的极具潜力的心血管疾病生物标志物。

截止目前，该标志物仅停留在实验室研究阶段，其研究方向主要是急性冠脉综合征及心力衰竭的病情评估和心梗、脑梗等疾病的预后。所采用的酶联免疫吸附方法，该方法存在抗体孵育时间长、洗涤次数多等弊端，不适用于临床一线检测。

申请号为201610798041.9的发明专利申请公开了一种人生长分化因子-15的检测试纸组件。该专利申请使用磁微粒偶联抗人生长分化因子15单克隆抗体制备结合垫，在检测线上包被抗人生长分化因子15多克隆抗体来捕获结合了样本中GDF15的磁微粒，通过检测线的磁力强度来进行定量。该技术的优点是解决了酶联免疫检测时间长的弊端，但其缺陷是市面上基于磁场强度检测的适用于检测卡的磁性免疫分析仪较少，因此限制了该产品的临床推广。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测生长分化因子-15的荧光免疫层析试纸条及其制备方法，该试纸条可以在荧光免疫分析上使用。

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：

本发明的一种检测人生长分化因子-15的荧光免疫层析试纸条，包括底板以及依次设在所述底板上的加样垫、结合垫、检测垫以及吸水垫，加样垫与结合垫搭接，检测垫与结合垫搭接，吸水垫与检测垫搭接，检测垫上设置有检测线和质检线，检测线位于加样垫一端，质检线位于远离加样垫一端，所述结合垫上包载有标记鼠抗人生长分化因子-15单克隆抗体的免疫荧光微球以及标记兔IgG的免疫荧光微球，所述的检测线上包被有鼠抗人生长分化因子-15单克隆捕获抗体，所述的质检线上包被有羊抗兔IgG多抗，标记免疫荧光微球所使用的鼠抗人生长分化因子-15单克隆抗体与检测线上包被的鼠抗人生长分化因子-15单克隆捕获抗体为具有不同抗原识别表位的单克隆抗体，且与生长分化因子-15能够形成抗体-抗原-抗体形式的复合物。

其中，优选的，所述的标记免疫荧光微球所使用的鼠抗人生长分化因子-15单克隆抗体为抗人生长分化因子-15单克隆抗体[23G10.F8]，货号ab105732，购自ABCAM公司；检测线上包被的鼠抗人生长分化因子-15单克隆捕获抗体为抗人生长分化因子-15单克隆抗体[7C12.B3.F2]，货号ab106112，购自ABCAM公司。