[发明专利]一种抗菌肽及其制备方法与应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗菌肽及其制备方法与应用。本发明提供的抗菌肽氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，分子量为1555Da，等电点为12.18，所述抗菌肽经全自动多肽合成仪合成，并经HPLC反相柱层析脱盐纯化所得。本发明提供的抗菌肽分子量小，抗菌谱广，抗菌活性高，主要作用用于抑菌，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、巴氏杆菌有显著的抑菌效果；可以作为饲料添加剂，应用于动物生产上，改善断奶仔猪的肠道健康；并通过提高断奶仔猪免疫球蛋白的浓度，提高断奶仔猪的免疫力，降低腹泻率，促进动物的健康生长。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗菌肽及其制备方法与应用。

背景技术

在畜牧养殖业中，抗生素作为饲料添加剂在动物日粮中被广泛应用，因为抗生素在提高动物生长性能和减少疾病方面发挥着重要的作用。研究发现，在动物日粮中使用抗生素，通过影响动物肠道微生物在其体内的定植从而起到促进动物健康生长的作用。然而，伴随着抗生素的大量使用、甚至滥用，它也随之产生了诸多不良影响，比如容易引起动物菌群失衡、产生耐药性、畜产品残留、危害人类的健康等。因此，要解决长期使用抗生素所造成的弊端，研究可以改善畜禽健康，提高生产性能且安全无毒的能替代抗生素的饲料添加剂具有重要意义。

抗菌肽作为自然界生物中广泛存在的一种小分子活性多肽，具有抗菌谱广、热稳定性好和不易产生耐药性等特点，是替代抗生素重要的潜在物质。然而，天然来源的抗菌肽大多存在分子量大而具有免疫原性、抗菌活性不高、对动物细胞具有毒副作用或会导致溶血等缺陷，在一定程度上限制了抗菌肽在生猪养殖中的推广应用。通过分子设计和改造获得分子量小、抗菌活性高和对动物细胞无毒副作用的抗菌肽是促进抗菌肽在生猪养殖中应用的有效手段。

基于此，中国专利申请CN109874909A公开了一种基于抗菌肽的饲料添加剂及制备工艺，但是，其是在抗菌肽的基础上又加入了女贞子萃取物、中草药提取物、酶解松针粉等多种组分，与抗菌肽一起，达到提高抑菌能力的效果，且其仅适用于常规畜禽，不能替代抗生素，但是对幼猪的肠道促进能力不足，且抗菌肽及其组分的共同加入，大大提高了饲料的制作成本。

同时，中国发明专利CN105166323B公开了一种复合饲料添加剂，其中加入了芽孢杆菌抗菌肽和芽孢杆菌益生菌，该复合饲料添加剂虽然可以替代抗生素，并具有防治各种动物腹泻、提高动物生产性能及免疫力等多种功能，但是该抗菌肽仅对芽孢杆菌具有抑制作用，并不能有效抑制其他细菌的生长，且最终的效果也没有很好。

综上所述，现有技术中的抗生素替代品普遍具有抗菌活性低，对动物细胞具有毒副作用或会导致溶血等缺陷。

发明内容

针对现有技术中普遍存在的缺陷，本发明创造性地提供了一种抗菌肽及其制备方法与应用。本发明提供的抗菌肽对动物常见感染君有显著的抑菌效果；可以作为饲料添加剂，应用于动物生产上，改善断奶仔猪的肠道健康。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种抗菌肽，所述抗菌肽具有如SEQ ID NO.1所述的氨基酸序列，分子量为1555Da，等电点为12.18。

RDRWVISAVRGFIH(SEQ ID NO.1)；

本发明还提供了所述抗菌肽的制备方法，包括如下步骤：

S1、将抗菌肽按SEQ ID NO.1所述序列信息进行合成，然后经无菌纯化水稀释至45～55μg/mL，得氨基酸溶液；

S2、将步骤S1制得的氨基酸溶液经HPLC反相柱层析脱盐纯化，即得。