[发明专利]一种鉴定甜瓜牛花花品种种子纯度的InDel分子标记及其应用

权利要求书

1.一种鉴定甜瓜牛花花品种种子纯度的InDel分子标记引物，其特征在于，所述引物序列如下：

C46-F：TTGGTGCAACTCCTCCAACT，

C46-R：GCCCAACCACGTGACATTAT。

2.权利要求1所述的InDel分子标记引物在鉴定甜瓜牛花花品种种子纯度中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于主要包括如下步骤：

（1）提取待检测甜瓜种子的基因组DNA；

（2）以该DNA为模板，利用所述InDel分子标记引物进行PCR扩增；

（3）对扩增结果进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测；

（4）分析检测结果，计算杂种种子数量占样品数量的比例，获得种子纯度。

4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述牛花花品种是中华人民共和国农业农村部公告第157号；证书号GPD甜瓜 (2019) 110062。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：步骤（1）中利用改良CTAB法提取待检测甜瓜种子的基因组DNA。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：步骤（3）所述电泳检测：使用8%的聚丙烯酰胺凝胶，在150V功率电泳分离2 h 15 min，然后进行银染显色。

7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：步骤（4）中，父本具有1条特征带，大小为219 bp，母本具有1条特征带，大小为253 bp，杂种一代同时具有父本和母本的两个特征带，种子纯度计算公式：纯度=杂交种个数/样品种子总数×100%。

8.一种鉴定甜瓜牛花花品种种子纯度的试剂盒，其特征在于，包括下述引物对：

C46-F：TTGGTGCAACTCCTCCAACT，

C46-R：GCCCAACCACGTGACATTAT。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于：还包括提取待检测甜瓜种子的基因组DNA的试剂。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于：还包括电泳检测的试剂。