[发明专利]一种秋葵栽培种与野生黄葵远缘杂交的胚拯救方法

权利要求书

1.一种秋葵栽培种与野生黄葵远缘杂交的胚拯救方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）远缘杂交：以秋葵栽培种为母本，以野生黄葵为父本，在母本开花前1~2d进行人工去雄并套袋，待母本柱头完全成熟可以分泌黏性物质时，利用收集的父本花粉进行授粉，授粉结束后及时套袋；

2）胚珠发育培养：远缘杂交授粉9~11d后从母本植株上摘取子房，先放入4℃冰箱进行低温处理 3~5d，然后进行消毒处理，在无菌条件下剥离出胚珠接种到发育培养基上，置于培养温度23~27℃、光照强度1500~2000lx、每日光照10~12h的条件下培养至胚珠发育；

3）幼胚萌发培养：将发育的胚珠进行横切，再转接至萌发培养基上，置于培养温度23~27℃、光照强度2000~3000lx、每日光照14~16h的条件下培养至幼胚萌发成具有子叶和胚根的胚；

4）幼胚成苗培养：将萌发的胚转接至成苗培养基上，置于培养温度23~27℃、光照强度3000~4000lx、每日光照14~16h的条件下培养直至胚长成完整试管苗；

5）炼苗及移栽：待试管苗生长稳定健壮时将其从瓶中取出，用清水洗除其根部残留的培养基，移栽到装有基质的营养钵中，放入温室，用透明塑料杯遮盖试管苗，逐步揭盖至完全揭开，使其完全适应外界环境，1周左右后带基质移栽到温室土壤中，正常栽培管理。

2.根据权利要求1所述的一种秋葵栽培种与野生黄葵远缘杂交的胚拯救方法，其特征在于，所述步骤1）中，授粉的时间为8:00-10:00，同一花蕾初次授粉2d后重复授粉1次。

3.根据权利要求1所述的一种秋葵栽培种与野生黄葵远缘杂交的胚拯救方法，其特征在于，所述步骤2）中，消毒处理的方法为：将子房用清水冲洗干净后放入超净工作台内，用75%酒精浸泡30s，并不断晃动，然后用无菌水漂洗1次，再放入0.1%氯化汞中浸泡10min并不断晃动，再用无菌水漂洗3次。

4.根据权利要求1所述的一种秋葵栽培种与野生黄葵远缘杂交的胚拯救方法，其特征在于，所述步骤2）中，发育培养基的配方为：MS+IAA1.5mg/L+6-BA 0.5mg/L +多效唑0.5mg/L+水解酪蛋白500mg/L+硝酸银8.0mg/L。

5.根据权利要求1所述的一种秋葵栽培种与野生黄葵远缘杂交的胚拯救方法，其特征在于，所述步骤2）中，胚珠发育是指胚珠转绿、膨大。