[发明专利]检测ABCB4 c.3508-16TC位点突变的引物和方法在审
申请号: | 202011514938.7 | 申请日: | 2020-12-21 |
公开(公告)号: | CN112608990A | 公开(公告)日: | 2021-04-06 |
发明(设计)人: | 董春燕;王淑一 | 申请(专利权)人: | 济南艾迪康医学检验中心有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人: | 黄素萍 |
地址: | 250031 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 abcb4 3508 16 tc 突变 引物 方法 | ||
1.检测ABCB4 c.3508-16TC位点突变情况的引物,其特征在于,包括:
扩增ABCB4 c.3508-16TC位点的引物,其碱基序列为:
ABCB4-A-F:
TGTAAAACGACGGCCAGTTGTAAATAGAACTGTCAACTGTTAAGC
ABCB4-A-R:AACAGCTATGACCATGTTTTCATGGTTGACAGCAAAATC。
2.如权利要求1所述的引物,其特征在于,还包括测序引物,其碱基序列为:
M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R:AACAGCTATGACCATG。
3.如权利要求1所述的引物,其特征在于,ABCB4-A-F和ABCB4-A-R的摩尔浓度比1:1。
4.如权利要求1所述的引物,其特征在于,M13F和M13R的摩尔浓度比1:1。
5.检测ABCB4 c.3508-16TC位点突变情况的方法,包括以下步骤:
(1)提取血液基因组DNA;
(2)利用一对PCR扩增引物扩增步骤(1)中提取的DNA,获取扩增产物;
(3)利用一对测序引物对步骤(2)中的扩增产物进行测序;
(4)对测序结果进行判断,确定ABCB4 c.3508-16TC位点是否发生突变;
其中所述一对PCR扩增引物的碱基序列为:
ABCB4-A-F:
TGTAAAACGACGGCCAGTTGTAAATAGAACTGTCAACTGTTAAGC
ABCB4-A-R:AACAGCTATGACCATGTTTTCATGGTTGACAGCAAAATC;
所述一对测序引物的碱基序列为:
M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R:AACAGCTATGACCATG。
6.一种检测ABCB4 c.3508-16TC位点突变的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:
(i)血液基因组DNA抽提试剂;
(ii)检测体系PCR扩增反应液:包括扩增ABCB4 c.3508-16TC位点的引物,其碱基序列为:
ABCB4-A-F:
TGTAAAACGACGGCCAGTTGTAAATAGAACTGTCAACTGTTAAGC
ABCB4-A-R:AACAGCTATGACCATGTTTTCATGGTTGACAGCAAAATC
(iii)阳性对照品和阴性对照品。
7.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括测序体系试剂:
包括测序引物,其碱基序列为:
M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R:AACAGCTATGACCATG。
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