[发明专利]耐高糖乳酸生产菌株及其在D-乳酸生产中的应用

权利要求书

1. 凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35，其在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC No. 21293。

2. 凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35-LjLDH，为将权利要求1所述凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35自身的D-乳酸脱氢酶基因替换为来源于詹氏乳杆菌的D-乳酸脱氢酶基因后得到的重组菌株；

来源于所述詹氏乳杆菌的D-乳酸脱氢酶基因如SEQ ID No.3所示。

3. 根据权利要求2所述的凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35-LjLDH，其特征在于：来源于所述詹氏乳杆菌的D-乳酸脱氢酶基因通过同源重组的方式原位替换所述凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35自身的D-乳酸脱氢酶基因。

4. 根据权利要求3所述的凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35-LjLDH，其特征在于：进行所述同源重组时的上游同源臂如SEQ ID No.1所示，下游同源臂如SEQ ID No.2所示。

5. 用于生产D-乳酸的成套产品，含有：

（1）权利要求1所述凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35或权利要求2-4中任一所述凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35-LjLDH；和

（2）发酵培养基；

所述发酵培养基中含有180-200g/L葡萄糖；0.5-1g/L有机氮。

6.根据权利要求5所述的成套产品，其特征在于：所述发酵培养基的溶剂为水，溶质及浓度如（A1）或（A2）：

（A1）葡萄糖 180-200g/L；酵母粉0.5~1g/L；硫酸铵4g/L；氯化铵4g/L；磷酸氢二钾0.2g/L；磷酸二氢钾0.2g/L；硫酸锌0.2g/L；碳酸钙100g/L；

（A2）葡萄糖 180-200g/L；酵母粉0.5~1g/L；硫酸铵4g/L；氯化铵4g/L；磷酸氢二钾0.2g/L；磷酸二氢钾0.2g/L；硫酸锌0.2g/L。

7. 权利要求1所述凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35或权利要求2-4中任一所述凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35-LjLDH或权利要求5所述成套产品在生产D-乳酸中的应用。

8. 权利要求1所述凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35或权利要求2-4中任一所述凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）G35-LjLDH在制备权利要求5所述成套产品中的应用。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述生产D-乳酸为在如下1）和/或2）和/或3）的条件下生产D-乳酸：1）利用高糖；2）利用低氮；3）在高温下；

所述高糖为180-200g/L葡萄糖；所述低氮为0.5-1g/L有机氮；所述高温为50-55℃。