[发明专利]长余辉分子信标探针、其构建方法及应用有效
申请号: | 202011516896.0 | 申请日: | 2020-12-21 |
公开(公告)号: | CN112725414B | 公开(公告)日: | 2022-04-29 |
发明(设计)人: | 王宇辉;郑建萍;王秀华 | 申请(专利权)人: | 中国科学院宁波材料技术与工程研究所慈溪生物医学工程研究所;中国科学院宁波材料技术与工程研究所 |
主分类号: | C12Q1/6818 | 分类号: | C12Q1/6818;C12Q1/6806;C12N15/11;C12N15/115;G01N33/532;G01N33/573;G01N33/68 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 王茹;王锋 |
地址: | 315000 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 余辉 分子 信标 探针 构建 方法 应用 | ||
1.一种长余辉分子信标探针,其特征在于包括:
分子信标;
分别修饰于分子信标的两个末端的荧光供体材料及能量受体材料;
其中,所述荧光供体材料为稀土基长余辉发光材料,所述稀土基长余辉发光材料为聚丙烯酸修饰的ZnGa2O4:Cr3+长余辉纳米晶,所述能量受体材料为淬灭剂,所述淬灭剂为具有淬灭长余辉性能的光学材料。
2.根据权利要求1所述的长余辉分子信标探针,其特征在于:所述淬灭剂包括有机淬灭染料、贵金属纳米材料、二维层状材料、聚合物纳米颗粒中的任意一种。
3.根据权利要求2所述的长余辉分子信标探针,其特征在于:所述有机淬灭染料为BHQ。
4.根据权利要求1所述的长余辉分子信标探针,其特征在于:所述分子信标包括核酸分子信标和/或茎环部分为核酸适配体的分子信标。
5.根据权利要求4所述的长余辉分子信标探针,其特征在于:所述核酸分子信标为检测靶DNA或RNA的分子信标,其具有如SEQ ID NO.1所示的序列或SEQ ID NO.2所示的序列。
6.根据权利要求4所述的长余辉分子信标探针,其特征在于:所述茎环部分为核酸适配体的分子信标为靶向识别凝血酶的分子信标,其具有如SEQ ID NO.3所示的序列。
7.如权利要求1-6中任一项所述长余辉分子信标探针的构建方法,其特征在于包括:通过EDC/NHS活化偶联方法使荧光供体材料与分子信标进行反应,获得所述长余辉分子信标探针。
8.根据权利要求7所述的构建方法,其特征在于包括:
将荧光供体材料溶解于MES缓冲溶液,之后加入EDC、NHS,室温震荡反应10~120 min;
采用碱液将所获反应液的pH值调节至7.4,之后加入0.5~3 OD分子信标,室温震荡反应2~24 h,获得所述长余辉分子信标探针。
9.根据权利要求7所述的构建方法,其特征在于,所述荧光供体材料为聚丙烯酸修饰的ZnGa2O4:Cr3+长余辉纳米晶,并且,所述聚丙烯酸修饰的ZnGa2O4:Cr3+长余辉纳米晶的制备方法包括:
使碱性物质、油酸、水和乙醇均匀混合,形成第一混合溶液;
使Zn源、Ga源、Cr源按照摩尔比为1:2:0.01~0.3进行均匀混合,形成第二混合溶液;
将所述第二混合溶液逐滴加入所述第一混合溶液中,并于室温均匀搅拌10~60 min,之后使形成的水热反应体系于180~220℃进行水热反应8~24 h,获得ZnGa2O4:Cr3+长余辉纳米晶;以及,
采用聚丙烯酸对所述ZnGa2O4:Cr3+长余辉纳米晶进行修饰,获得所述聚丙烯酸修饰的ZnGa2O4:Cr3+长余辉纳米晶。
10.根据权利要求9所述的构建方法,其特征在于:所述碱性物质为NaOH,所述Zn源为Zn(NO3)2,所述Ga源为Ga(NO3)3,所述Cr源为Cr(NO3)3。
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