[发明专利]一种灵长类动物支气管哮喘模型的构建方法

说明书

本发明公开了一种灵长类动物支气管哮喘模型的构建方法。本发明方法包括以下步骤：以屋尘螨为致敏原，对灵长类动物采用第一周腹腔注射给药，第二周腹腔注射给药，第四周皮下注射给药，第五周雾化给药，第七周肌肉注射给药，第八周雾化给药，第十二周肌肉注射给药，第十五周雾化给药的方式致敏，构建得到支气管哮喘的灵长类动物模型。本方法建立的食蟹猴支气管哮喘模型在炎症细胞、血清炎症细胞因子、气道阻塞特征、发病症状方面都符合哮喘的临床特征，并且致敏原皮试超敏反应呈阳性，说明造模后屋尘螨已在猴子体内致敏。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种灵长类动物支气管哮喘模型的构建方法。

背景技术

支气管哮喘是尘螨等变应原通过长时间的致敏引起的慢性气道炎症。现有技术中啮齿类哮喘模型已较成熟，但非人灵长类动物与啮齿类动物相比与人类更相近，使用非人灵长类动物模型的药物研究结果更能反映临床疾病变化，更具临床药物评价参考价值。国际上灵长类实验动物哮喘模型鲜少有报道，大多数都是用啮齿类动物造模，且无论用何种变应原，都是在1个月内完成诱导给药^[1-3]。

在现有的技术中多数使用卵清蛋白(OVA)致敏，加上造模时间过短，由于鸡卵清白蛋白并不是一个在人体引发疾病的过敏原，所获得的研究结果，并不能很好地反映人类哮喘疾病的发生发病过程及病理状态。

现有技术中有一例屋尘螨诱导食蟹猴制备哮喘模型的报道^[4]。在该报道中，造模时间长达282天，时间过长导致模型成本升高且不利于规模化生产。

参考文献：

[1]张丹参,张楠.诱发支气管哮喘动物模型方法及评价[J].神经药理学报，2019,9(4):4.

[2]邹文静,王婷,等.C57b1/6小鼠OVA哮喘模型的建立与评价[J].重庆医科大学学报,2018,43(7):894-898.

[3]曾露.尘螨过敏原Derf 31诱发过敏性哮喘的机制研究.

[4]Edward S.Schelegle,et.Allergic asthma induced in rhesus monkeys byhouse dust mite(Dermatophagoides farinae)[J].American Journal of Pathology,2001,158(1):333-340.

发明内容

本发明的目的是提供一种灵长类动物支气管哮喘模型的构建方法。

本发明的灵长类动物支气管哮喘模型的构建方法，包括以下步骤：

以屋尘螨为致敏原，对灵长类动物采用第一周腹腔注射给药，第二周腹腔注射给药，第四周皮下注射给药，第五周雾化给药，第七周肌肉注射给药，第八周雾化给药，第十二周肌肉注射给药，第十五周雾化给药的方式致敏，构建得到灵长类动物支气管哮喘模型。

优选，所述的灵长类动物为食蟹猴。

优选，所述的注射给药，注射药剂含有1.35mg/mL屋尘螨、25mg/mL氢氧化铝和20mg/mL羟丙基甲基纤维素(HPMC)，余量为质量分数0.9％氯化钠水溶液。

优选，所述的腹腔注射给药、皮下注射给药和肌肉注射给药的给药量为1mL/kg。

优选，所述的皮下注射为多点注射。

优选，所述的雾化给药，雾化药剂为含2.4mg/mL屋尘螨的质量分数0.9％氯化钠水溶液。

优选，所述的雾化给药方式为：用50mg/mL盐酸氯胺酮水溶液以0.1mL/kg的量肌肉注射液麻醉猴子，麻醉后用雾化器雾化所述的雾化药剂，让猴子吸收，每次吸收40个呼吸。