[发明专利]一种代谢物ADMA在制备早期骨关节炎诊断试剂盒中的应用

说明书

本发明公开了一种代谢物ADMA在制备骨关节炎诊断试剂盒中的应用。现有骨关节炎的诊断方法依赖影像学检查与临床表现。X线表现为关节间隙狭窄，关节面模糊，软骨下骨增生、关节腔骨赘形成与关节融合及脱位等。本发明将代谢物ADMA作为骨关节炎诊断的标记物，用以制备诊断关节炎，特别是早期关节炎的试剂盒。该关节炎试剂盒包括ADMA粉末、ADMA‑D7、甲酸、乙腈和超纯去离子水。本发明利用关节液中代谢物ADMA含量与关节炎患病情况的高度关联性，以代谢物ADMA为标记物，提供了能够检测关节炎，特别是早期关节炎的试剂盒。本发明提供的关节炎试剂盒具有检测速度快、重复性好、高灵敏度及高特异度的特点，且无放射性危害。

技术领域

本发明属于分析化学及临床医学技术领域，具体涉及一种代谢物ADMA在制备骨关节炎试剂盒中的应用及代谢物ADMA的定量分析方法。

背景技术

骨关节炎(OA)又名退行性骨关节病，好发于负重大、活动多的关节，是一种以关节软骨退变、磨损、滑膜炎症以及骨赘增生等为特征的慢性退行性疾病。其高发于中老年人群，临床表现主要有关节疼痛肿胀与活动受限。根据最新的中国流行病学调查数据，65岁以上的老年人有较高的骨关节炎患病率，其中男性影像学患病率达27％，临床患病率达7％；女性影像学患病率高达46％，临床患病率达15％。骨关节炎患者的全球伤残调整生命年在非传染疾病中位居前十，疼痛与功能障碍给患者造成了极大的痛苦，也给社会经济造成了沉重的负担。

现有骨关节炎的诊断方法主要基于影像学检查与临床表现。X线表现为关节间隙狭窄，关节面模糊，软骨下骨增生、关节腔骨赘形成与关节融合及脱位等。MRI可显示关节腔内的积液与软组织情况，对于半月板、软骨的病变有也较好的提示作用。而影像学检测通常伴有一定的射线，或者有较为高昂的费用。而早期骨关节炎又无明显的临床症状与影像学表现，这不利于骨关节炎的早期发现与干预。当关节炎患者出现临床症状而就医时，其病程通常已达晚期，手术治疗是唯一的方法。因此，我们试图通过检测关节液中某些特定的生化指标，来辅助骨关节炎病人的早期诊断。同时，检测关节液中的生化代谢物具有可操作性强、分析速度快的优点。有研究表明，非骨关节炎患者关节液中非对称性二甲基精氨酸(ADMA)含量与血浆中相似，而关节炎患者关节液中ADMA含量显著高于血浆。我们前期研究表明，ADMA与骨关节炎有较为密切的关系，早期关节炎患者关节液中ADMA水平即有显著升高。因此，测定膝关节关节液中ADMA的含量，将有利于辅助骨关节炎的早期诊断，提高诊断方法的敏感性。这种方法相比传统方法具有简便快速、无射线的优点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种代谢物ADMA在骨关节炎诊断的应用及试剂盒和定量分析方法。

本发明将代谢物ADMA作为骨关节炎诊断的标记物，用以制备诊断关节炎，特别是早期关节炎的试剂盒。该关节炎试剂盒包括ADMA粉末、ADMA-D7、甲酸、乙腈和超纯去离子水。

作为优选，判定关节炎的ADMA浓度阈值为366.08μg/mL。

作为优选，关节炎试剂盒配合液相色谱质谱联用仪来检测关节液中的ADMA含量。

作为优选，液相色谱质谱联用仪检测ADMA含量时使用的标准曲线的回归方程为 Y＝89.853X-5.7004。其中，X为ADMA浓度，Y为ADMA峰面积与内标峰面积之比。

该关节炎试剂盒的检测ADMA浓度的使用方法如下：

步骤1.采集被测者的关节液。

步骤2.样本分析

2-1.对关节液进行预处理

2-2.用关节炎试剂盒中ADMA粉末和ADMA-D7作为标准品配置梯度浓度的多个标准曲线溶液工作液，并分别进行液相色谱质谱联用检测获得浓度为横坐标X，以标准品峰面积与内标峰面积之比作为纵坐标Y的标准曲线。