[发明专利]CD19和CD10双靶点嵌合抗原受体及其应用有效
| 申请号： | 202011524344.4 | 申请日： | 2020-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN112521515B | 公开（公告）日： | 2022-02-15 |
| 发明（设计）人： | 汤朝阳;秦乐;吴迪;冯世忠;冯嘉昆;杨乐旋;其他发明人请求不公开姓名 | 申请（专利权）人： | 汤朝阳 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 528399 广东省佛山市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | cd19 cd10 双靶点 嵌合 抗原 受体 及其 应用 | ||
1.一种嵌合抗原受体，其特征在于，
所述嵌合抗原受体由GM-CSF信号肽、抗CD19单链抗体、连接肽、抗CD10单链抗体、CD28和CD3ζ串联组成；
所述抗CD19单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；
所述抗CD10单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；
所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.一种编码基因，其特征在于，所述编码基因编码权利要求1所述的嵌合抗原受体；
所述编码基因包括抗CD19单链抗体编码序列和抗CD10单链抗体编码序列；
所述抗CD19单链抗体的编码序列如SEQ ID NO:4所示；
所述抗CD10单链抗体的编码序列如SEQ ID NO:5所示；
所述嵌合抗原受体的编码基因的核酸序列如SEQ ID NO:6所示。
3.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体为含有权利要求2所述的编码基因的病毒载体；
所述病毒载体为慢病毒载体、逆转录病毒载体或腺相关病毒载体中的任意一种。
4.一种重组慢病毒，其特征在于，所述重组慢病毒由转染有权利要求3所述的表达载体和辅助质粒的哺乳细胞制备得到。
5.一种CAR-T细胞，其特征在于，所述CAR-T细胞表达权利要求1所述的嵌合抗原受体；
所述CAR-T细胞的基因组中整合有权利要求2所述的编码基因。
6.根据权利要求5所述的CAR-T细胞，其特征在于，所述CAR-T细胞包括权利要求3所述的表达载体和/或权利要求4所述的重组慢病毒。
7.权利要求5或6所述的CAR-T细胞的制备方法，其特征在于，所述方法包括将编码权利要求1所述的嵌合抗原受体的基因导入T细胞的步骤。
8.权利要求1所述的嵌合抗原受体、权利要求2所述的编码基因、权利要求3所述的表达载体、权利要求4所述的重组慢病毒或权利要求5或6所述的CAR-T细胞在制备疾病治疗药物中的应用；
所述疾病为CD19阳性和/或CD10阳性肿瘤。
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