[发明专利]高效液相色谱串联质谱法测定抑郁症患者血清中左旋肉碱和乙酰左旋肉碱含量的方法

权利要求书

1.一种高效液相色谱串联质谱法测定抑郁症患者血清中左旋肉碱和乙酰左旋肉碱含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1.标准曲线的绘制：

制备人血清中浓度为0.1、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、10.0和16.0 μg/mL的ALC，浓度为0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0和16.0 μg/mL的LC；在一定液相色谱和质谱条件下，采用基线减法构建标准曲线，在每批测定中，通过运行仅添加IS的空白血浆样品进行基线减法，根据分析物浓度绘制一系列标准曲线，以样品的分析物与IS峰面积比值减去空白样品中分析物与IS峰面积比值为纵坐标，以浓度为横坐标，分别在0.1-16.0 μg/mL和0.5-16.0 μg/mL的浓度范围内建立标准曲线；

S2.样本处理与上机测试：

100 μL血清中加入10 μL 内标溶液，涡旋振荡30 s后，加入1mL ACN /水到每个样品中以沉淀蛋白质，涡旋振荡1分钟后在4°C下16000 rpm/min 离心10分钟除去沉淀物；取上清液注入UPLC-MS/MS系统进行分析。

2.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱串联质谱法测定抑郁症患者血清中左旋肉碱和乙酰左旋肉碱含量的方法，其特征在于：步骤S1中，色谱条件为：流动相A为水，B为甲醇；流速为0.2 ml/min；内标为乙酰左旋肉碱-d₃；梯度洗脱，梯度曲线如下：0～0.5min，20%～20% B；0.5～1.5min，20%～95% B；1.5～2.0min，95%～95% B；2.0～2.1min，95%～20% B；2.1～2.5min，20%～20% B；进样量为0.2 μL。

3.根据权利要求2所述的一种高效液相色谱串联质谱法测定抑郁症患者血清中左旋肉碱和乙酰左旋肉碱含量的方法，其特征在于：所述流动相A为含0.01%氨水的水。

4.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱串联质谱法测定抑郁症患者血清中左旋肉碱和乙酰左旋肉碱含量的方法，其特征在于：步骤S1中，质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；电离模式：正离子模式；操作方式：多重反应监测；毛细管电压：3.0 kV；离子源温度：150°C；去溶剂温度：450 °C；氮气脱溶气流量：1000 L/h；氮气锥气流量：150 L/h。

5.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱串联质谱法测定抑郁症患者血清中左旋肉碱和乙酰左旋肉碱含量的方法，其特征在于：步骤S2中，ACN与水的体积比为2:1。