[发明专利]块根植物的转基因或基因编辑新苗的培育方法

说明书

块根植物的转基因或基因编辑新苗的培育方法，包括：用携带质粒的发根农杆菌侵染块根植物的茎部，培养侵染后的块根植物茎部至萌发出毛状根；继续培养侵染后的块根植物茎部使毛状根发育成块根得转基因或基因编辑的块根；培养获得的块根至萌发出新苗即得转基因或基因编辑新苗。本发明的方法操作简便，成本低，周期短，转化效率高，可大大缩短甘薯基因功能研究和基因工程育种的周期；此外许多农作物品种能够靠块根进行繁育，比如木薯、山药等，该转基因技术也能够应用于此类作物。

技术领域

本发明属于遗传工程领域，具体地说，涉及一种新型的块根植物的转基因或基因编辑新苗的培育方法。

背景技术

中国是世界上最大的甘薯生产国，甘薯不单是重要的粮食作物，具有很高的食用价值，还可以作为工业原料、能源物质应用于生产的方方面面。随着人民生活水平的提高，培育优质高产的甘薯品种是现在育种学家面临的共同课题。在甘薯的科学研究中遗传转化一般运用侵染愈伤组织的方法，此类方法存在技术要求高、成本高、周期长等缺点，所以目前只有极少数研究机构掌握了甘薯的转化技术，这也极大制约了甘薯科学研究的进展。所以新型转基因技术的发明将推动甘薯基因工程育种和基因功能科学研究的进程。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作方便、效率高、成本低、周期短的块根植物转基因或基因编辑新苗的培育方法以缩短甘薯基因功能研究和基因工程中的育种周期。

为实现上述发明目的，本发明的技术方案具体如下：

块根植物的转基因或基因编辑新苗的培育方法，包括以下步骤：

S1：用携带质粒的发根农杆菌侵染块根植物的茎部，培养侵染后的块根植物茎部至萌发出毛状根；

S2：继续培养侵染后的块根植物茎部使毛状根发育成块根得转基因或基因编辑的块根；

S3：培养步骤S2获得的块根至萌发出新苗即得转基因或基因编辑新苗。

作为优选的技术方案，所述步骤S2包括：检查毛状根判断是否成功侵染；若侵染成功则继续培养侵染后的块根植物茎部使毛状根发育成块根得转基因或基因编辑的块根；若侵染不成功则重复步骤S1。

作为优选的技术方案，所述步骤S3包括：培养步骤S2获得的块根至萌发出新苗，对新苗进行检测，筛选出转基因或基因编辑新苗，若筛选不成功则重复步骤S1。

作为优选的技术方案，所述质粒是带外源DNA的质粒。

作为优选的技术方案，所述块根植物是木薯。

作为优选的技术方案，所述块根植物是山药。

作为优选的技术方案，所述块根植物是甘薯。

作为优选的技术方案，所述步骤S1包括：所述步骤S1包括：将甘薯苗的茎部的地上部分切下，之后将甘薯苗的茎部切面涂抹上或注射携带质粒的发根农杆菌，将幼苗基部插入新的基质或营养土或保湿棉中，温室条件下培养至萌发出毛状根；

所述步骤S2包括：取出幼苗，切下部分毛状根段进行检测，筛选出侵染成功的幼苗，继续培养侵染成功的幼苗使毛状根发育成甘薯块；

所述步骤S3包括：培养步骤S2获得的甘薯块，至萌发出甘薯苗，对甘薯苗进行检测，筛选出转基因或基因编辑甘薯苗，若无转基因或基因编辑甘薯苗则重复步骤S2。

与现有技术相比，本发明的有益效果：

本发明的方法操作方便、转化率高、成本低、周期短；可大大缩短甘薯基因功能研究和基因工程育种的周期；此外许多农作物品种能够靠块根进行繁育，比如木薯、山药等，该转基因技术也能够应用于此类作物。

附图说明

图1为本发明步骤1中35S::GFP载体部分序列图谱；