[发明专利]一种防治棉花枯萎病的生防菌株、生防菌剂及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种防治棉花枯萎病的生防菌株，命名为Pseudomonas alloputida Pa2，保藏日期为2020年11月9日，保藏编号：CGMCC NO.21149；本发明的生防菌株生产工艺简单、培养时间短、成本低，且该菌株可以通过简单、快捷低成本的制备方法获得防治棉花枯萎病的生防制剂；其抑菌效果非常明显，经过试验证明，本发明提供的生防制剂在温室盆栽条件下对棉花枯萎病的防效达到了74.48％，田间条件对棉花枯萎病的防效达到了70.11％，显著优于对照，进而大幅度促进农民增收。

技术领域

本发明涉及微生物应用技术领域，具体涉及一种防治棉花枯萎病的生防菌株、生防菌剂及其制备方法与应用。

背景技术

棉花枯萎病是全球性两大棉花病害之一，对世界各产棉国的棉花生产都造成了不同程度的影响，我国也深受其害。尖孢镰刀菌萎蔫专化型真菌(Fusarium oxysporumf.sp.Vasinfectum)是棉花枯萎病的病原菌，它在自然条件下很容易存活，能够产生分生孢子，主要通过土壤、种子和肥料进行传播。尖孢镰刀菌通常只侵染棉花、秋葵和红麻等少数植物，在温室或病圃接种条件下，可以侵染麦类、茄科、豆科、瓜类和烟草等多种植物。棉花枯萎病是典型的维管束病害，棉花在整个生长发育期均可染病。有很多种类型的发病症状，苗期有青枯型、黄化型、皱缩型、黄色网纹型、红叶型等；蕾期有皱缩型、枯斑型、半边黄化型、顶枯型、光秆型等。该病常造成棉花前期大量死苗，后期叶片及蕾铃大量脱落，甚至枯死。我国棉花枯萎病的重灾区发病率高达60％-70％，死苗率达35％-40％，一般造成减产20％～30％左右。棉花枯萎病的防治是提高棉花产量的重要途径之一。

目前防治棉花枯萎病的主要方法有药物防治、科学的田间管理和选用抗病品种。这些方法有各自的优点和局限。化学药剂在棉花病害防治中有一定的作用，在棉花枯萎病的防治中应用也比较广泛。通常在播种前用稀释的抗菌剂402药液或多菌灵胶悬剂浸种，以达到杀灭病原菌的目的。常见的杀菌农药有多菌灵、甲基托布津、56％醚菌酯百菌清、41％聚砹嘧霉胺、克黄枯、20％硅唑咪鲜胺、枯黄基因素、棉花三清等。化学药剂用于零星病区的病株和局部土壤处理效果较显著。然而，化学药剂毒性较大，且绝大多数药剂都易挥发，农药经过口、吸呼道或直接接触而大量进入施药人体内，易引起急性中毒。且绝大多数化学药都具有致癌、致畸、致突变的性质，农药进入食物链后，会在各级消费者体内积累，严重危害人和动物的健康。

科学的田间管理包括轮作、秋耕深翻、合理密植、及时清除病苗等方法。但受到种植习惯和自然环境的影响，轮作在推广应用时存在一定困难，且枯萎病菌在土壤中存活的时间较长，短期轮作达不到明显的防治效果，长期轮作又不容易实施。秋耕深翻和合理密植等田间管理方法均无法彻底杀灭病原菌，对棉花枯萎病的防治作用有限。

使用抗病品种是一种经济有效的防病措施，目前应用比较广泛。但抗病品种的选育周期较长，研发成本较高；有些品种抗性尚不能满足生产需要；棉花枯萎病菌易变异，存在致病力分化的现象，当大面积栽培单一抗病品种时，存在抗病性丧失的风险。

因此，开发成本低、效果好、环境友好、健康、可持续的生物防治方法，是当前棉花枯萎病的防治中面临的急需解决的难题。当前虽有一些棉花枯萎病的生防菌被研究，但由于棉花枯萎病特殊的生物学特性，这些生防菌的田间防效始终差强人意，至今没有成功在生产一线大面积推广的生防菌剂的问世。

发明内容

本发明的目的是为了解决以上现有技术的不足，提供一种可以防治棉花枯萎病的细菌菌株，还提供了一种包含上述细菌菌株的生防菌剂，可以很好地应用于棉花枯萎病的防治工作中。

为实现本发明的上述目的，采用了以下技术方案：

一种防治棉花枯萎病的生防菌株，命名为Pseudomonas alloputida Pa2，保藏日期为2020年11月9日，保藏地址：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号：CGMCC NO.21149。