[发明专利]HPLC法分离测定噁拉戈利钠关键中间体及其相关杂质的方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及HPLC法分离测定噁拉戈利钠关键中间体及其相关杂质的方法，采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以磷酸盐缓冲液和乙腈为A流动相，乙腈和甲醇混合液为B流动相，进行梯度洗脱，进入检测器进行检测。本发明可以有效地将噁拉戈利钠关键中间体及其相关杂质分开，且该方法具有很高的灵敏度及分离度，重复性及耐用性好，操作简单，结果稳定可靠，对于实现噁拉戈利钠中间体质量控制具有极其重要的意义。

技术领域

本发明涉及分析化学领域，尤其是一种分离测定噁拉戈利钠关键中间体及其相关杂质的方法。

背景技术

噁拉戈利钠为是一种GnRH受体拮抗剂，通过与脑垂体中的GnRH受体竞争性结合来抑制内源性GnRH信号传导，噁拉戈利钠给药导致黄体生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)的剂量依赖性抑制，导致卵巢性激素，雌二醇和黄体酮的血液浓度降低，临床适用于治疗与子宫内膜异位症相关的中度至重度疼痛。

目前由于噁拉戈利上市不久，其质量标准还未收录于最新版美国药典中，相关分析方法报道比较少。专利CN110501446公开了一种噁拉戈利钠原料及其合成中间体的分析方法，对原料药和4个起始物料以及3个中间体进行了检测，但是该分析方法未考虑原料带入的杂质和工艺过程中产生的杂质，远不能满足实际生产过程中质量控制的需求。

通常来说，一种药物杂质总含量应小于1.0％，单个杂质含量应小于0.1％，对于制备噁拉戈利钠过程中产生的杂质或引入的有关物质，不论是在原料药还是制剂中均需要进行严格控制。5-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-6-甲基嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮为噁拉戈利钠的关键中间体，该化合物的质量控制对高质量的噁拉戈利钠原料药制备起到重要的作用，所以开发一种高效且精确的分析方法，对噁拉戈利钠关键中间体进行质量分析，对后续制备高纯度的噁拉戈利钠有着重要的意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种HPLC法分离测定噁拉戈利钠关键中间体及其相关杂质的方法；本发明的方法可以有效的将噁拉戈利钠关键中间体及其相关杂质分开，且该方法具有很高的灵敏度及分离度，重复性及耐用性良好，操作简单，结果稳定可靠。

为实现上述目的，本申请人经过大量的试验，确定了本发明的技术方案为：

HPLC法分离测定噁拉戈利钠关键中间体及其相关杂质的方法，所述方法采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，采用流动相A与流动相B进行梯度洗脱，进入检测器进行检测；所述相关杂质包括杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H、杂质I、杂质J、杂质K、杂质L、杂质M中的一种或者多种，具体结构式如下所示：

所述流动相A为磷酸盐缓冲液与有机溶剂的混合溶剂，所述流动相B为有机溶剂。

所述噁拉戈利钠关键中间体为5-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-6-甲基嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮，是合成噁拉戈利钠的关键中间体，其化学式为C₂₀H₁₅F₅N₂O₃，结构式如式(Ⅰ)如下：

本发明中，“噁拉戈利钠的关键中间体”又称为“式Ⅰ化合物”；

该化合物可以以1-(2-氟-6-(三氟甲基)苄基)脲为原料，通过以下制备方法得到：

进一步，所述流动相A为磷酸盐缓冲液与-乙腈体积比为95:5；

所述磷酸盐缓冲液是15～25mmol/L的磷酸氢二钾水溶液，磷酸氢二钾水溶液用磷酸调节pH值至5.6-6.0；优选磷酸氢二钾水溶液用磷酸调节pH值5.8；