[发明专利]一种葵花盘中异槲皮苷的提取方法、异槲皮苷在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂中的应用

说明书

本发明提供了一种葵花盘中异槲皮苷提取方法、异槲皮苷作为黄嘌呤氧化酶抑制剂的应用。本发明先使用乙醇对葵花盘粉碎物进行乙醇提取，能够将葵花盘中的总黄酮类化合物提取出来；之后使用石油醚、乙酸乙酯对乙醇提取物分级萃取1～3次，利用相似相容的原理，使总黄酮类化合物中的异槲皮苷溶于乙酸乙酯中，其余成分大多分布于其他萃取剂中；最后对乙酸乙酯层提取物进行聚酰胺柱层析，使用体积浓度为30％的乙醇溶液作为洗脱液，能够最大程度对异槲皮苷进行分离，经去除溶剂后得到异槲皮苷提取物。本发明提供了异槲皮苷作为黄嘌呤氧化酶抑制剂的应用。本发明首次验证了异槲皮苷对黄嘌呤氧化酶具有很好的抑制作用。

技术领域

本发明涉及药物提纯技术领域，特别涉及一种葵花盘中异槲皮苷提取方法、异槲皮苷在制备黄嘌呤氧化酶抑制剂中的应用。

背景技术

向日葵是全球商业化种植的菊科的一个物种，是油类生产中应用最广泛的作物之一，葵花籽油在世界上排名第四，仅次于棕榈油、大豆和菜籽油。在每年的收获季节，很多人会在脱掉葵花籽后将葵花盘丢弃，却忽略了葵花盘的药用价值。

黄酮类化合物(flavonoids)是植物中普遍存在的低分子量次级代谢产物。黄酮类化合物是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮结构的化合物，目前泛指三碳连接两个带有酚羟基苯环的一系列化合物。黄酮类化合物具有多样性代谢功能，包括生长和发育的调节，平衡植物对生物和非生物的抗逆性等。

异槲皮苷又名罗布麻甲素、槲皮素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，是黄酮类化合物中的一种。异槲皮苷是罗布麻、新疆圆柏等植物中的有效成分，最近几年又在金银花、金花葵花(CN110590882A)被陆续发现。异槲皮苷具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、降血压、降血糖等多种生物学活性，现代药理学已成为近年来天然活性成分的研究热点之一。但是未见有关向日葵花盘中含有异槲皮苷成分的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种葵花盘中异槲皮苷提取方法及异槲皮苷作为黄嘌呤氧化酶抑制剂的应用。本发明方法能够将异槲皮苷从葵花盘中提取出来。

为了实现上述发明的目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种葵花盘中异槲皮苷的提取方法，包括以下步骤：

(1)将葵花盘粉碎物与乙醇混合，进行乙醇提取，得到乙醇提取物；

(2)对所述乙醇提取物进行分级萃取，所述分级萃取使用的萃取剂依次为石油醚、乙酸乙酯，每种萃取剂的萃取次数独立为1～3次；

合并乙酸乙酯萃取液，对乙酸乙酯萃取液进行浓缩和干燥，得到乙酸乙酯层提取物；

(3)对所述乙酸乙酯层提取物进行柱层析，所述柱层析的固定相为聚酰胺，流动相为体积浓度为20～50％的乙醇溶液，收集柱层析洗脱液；

(4)去除所述柱层析洗脱液的溶剂，得到异槲皮苷提取物。

优选的，所述葵花盘粉碎物的粒径为10～20目；

所述步骤(1)中乙醇的体积浓度为50～60％；所述葵花盘粉碎物的质量与乙醇的体积比为1g：20～30mL。

优选的，所述步骤(1)中乙醇提取的温度为60～70℃，时间为2～3h。

优选的，所述步骤(2)中乙醇提取物与石油醚、乙酸乙酯的体积比均为1:2～3，分级萃取时石油醚、乙酸乙酯的萃取时间独立为15～30min。

优选的，所述步骤(2)中浓缩的方式为减压浓缩，所述减压浓缩的压力为0.06～0.09MPa，温度为50～70℃；所述干燥的温度为50～70℃。

优选的，所述步骤(3)中柱层析的洗脱体积为2～3柱体积，洗脱速率为0.5～1.5mL/min。