[发明专利]一种艾叶中黄酮类化合物的纯化方法

说明书

本发明属于黄酮类物质纯化技术领域，具体地，涉及一种艾叶中黄酮类化合物的纯化方法。能够高效从艾叶中分离黄酮类化合物，从而弥补现有技术的不足。本方法以艾叶为原料，用70％乙醇提取的粗黄酮类化合物与金属盐反应，搅拌，调节反应温度和pH值，反应完全后收集沉淀并分散于30％乙醇溶液中，然后加入乙二胺四乙酸(EDTA)解络合剂震荡反应，至沉淀完全溶解，减压浓缩脱除溶剂，再用甲醇溶解过滤，滤液浓缩，用洗涤液洗涤、干燥即得纯化后艾叶黄酮类化合物。本化学提取方法可使艾叶黄酮类化合物含量达80％以上，且结构保持完整(以异泽兰黄素为例)。本发明与已有的方法相比，工艺流程简单，操作周期短，原料易得，耗能低，效率高，是一种有发展前景的黄酮类化合物的纯化方法。

技术领域：

本发明属于黄酮类物质纯化技术领域，特别是涉及一种艾叶中黄酮类化合物的纯化方法。

背景技术：

艾叶在全国各地均有分布，目前公认湖北蕲春所产艾叶质量最佳，是艾叶的道地产区，蕲春所产艾叶又称“蕲艾”。据文献报道，蕲艾中含有丰富的黄酮类化合物，约占干燥艾叶的3.9％。现代药理表明黄酮类化合物具有抗氧化、清除自由基、抗肿瘤、抗炎、清热镇痛、抗菌等多种生理活性及药理作用，且无毒无害，对治疗和预防肿瘤、心血管疾病等疾病有显著效果，对延缓人体的衰老有重要意义。但前人的研究多集中于艾叶的挥发性成分，近年的研究发现艾叶黄酮也是艾叶发挥药效的主要成分，其中的一些成分如异泽兰黄素在国外有大量研究报道，以其为主要成分的亚细亚蒿提取物已被开发为药物，而我国目前对艾叶黄酮研究和利用尚未引起重视。目前的黄酮类化合物的纯化主要有硅胶柱层析法和大孔树脂吸附法，纯化周期长，产率低。因此，寻求一种更加方便快捷、生产周期短的纯化方法成为研究热点。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种艾叶中黄酮类物质的纯方法，能够高效的从艾叶中分离黄酮类物质，从而弥补现有技术的不足。

本发明的方法，包括如下步骤：

1)粗提物的制备

将艾叶烘干粉碎成艾绒，取艾绒30g，按1∶15的料液比加入70％的乙醇，在55℃下机械搅拌4h，油浴85℃条件下加热回流2h，减压过滤，滤渣再以1∶15的料液比加入70％的乙醇，油浴85℃条件下加热回流2h，减压过滤，合并两次提取滤液，减压浓缩脱除溶剂，即得艾叶黄酮类化合物的粗提物。

2)艾叶黄酮-金属络合物的制备：

将步骤1)所得的艾叶黄酮类化合物的粗提物用70％～75％的乙醇溶液配置成浓度为10～20mg/mL的溶液，边搅拌边加入金属盐；调节溶液的pH值为8～10进行络合反应，反应结束后收集沉淀，该沉淀为艾叶黄酮-金属络合物。

3)艾叶黄酮-金属络合物的解离：

将步骤2)所得艾叶黄酮---金属络合物均匀分散于30％的乙醇溶液中，加入EDTA进行解络合反应，震荡反应至沉淀完全溶解，冷却至室温，旋转蒸发仪上减压脱除溶剂，用甲醇溶解，过滤，将滤液浓缩、洗涤、减压过滤、干燥即得纯化后得艾叶黄酮类化合物。

步骤2)中的金属盐为乙酸锌或氯化锌。

步骤2)中加入金属盐的量为艾叶黄酮类化合物物质的量的2～3倍。

步骤2)中调节pH的溶液用10％氢氧化钠溶液。

步骤2)中络合反应温度为55℃～70℃。

步骤2)中络合反应时间为90min～120min。

步骤3)中EDTA的加入终浓度为15-40mg/mL。

步骤3)解络合反应温度为65℃～75℃。

为了提高制成的茶叶黄酮类化合物的纯度，将步骤3)制成的茶叶黄酮类化合物用蒸馏水进行清洗。