[发明专利]同时提升银杏叶中内酯A、C和白果内酯含量的促生制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种同时提升银杏叶中内酯A、C和白果内酯含量的促生制剂及其制备方法和应用。本发明所述促生制剂包括以重量份计的以下成分：尖孢镰刀菌4.5‑6.5份、毛霉5.6‑8.0份和尤韦可拟盘多毛孢15‑25份。将菌种分别制得后按比例混合振荡均匀即得。本发明的促生制剂制作方法简单，实用性强。该促生制剂结合多个菌种配制而成，在银杏育苗或栽培的过程中施加到根部或叶片上，能够促使银杏叶中的内酯A、C和白果含量及纯度提升，极大地提高了经济价值和药用价值，具有极大的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种同时提升银杏叶中内酯A、C和白果内酯含量的促生制剂及其制备方法和应用。

背景技术

银杏是一种古老的药用植物，银杏提取物(Extracts of Ginkgo biloba,EGb)的主要有效成分是黄酮类化合物和萜内酯类化合物，黄酮类化合物约有38种，总含量为22-27％。银杏内酯属于萜类化合物，银杏内酯类化合物包括银杏内酯和白果内酯，总含量为5.4-6.6％，银杏内酯主要包括银杏内酯A、B、C、J和M单体。据文献报道，银杏内酯中各单体的药物功能有一定差异，银杏内酯均为强血小板活化因子拮抗剂，是银杏叶中特殊生理活性的关键成分，其中银杏内酯A、B、C对治疗心脑血管疾病具有显著疗效；而白果内酯对治疗神经系统疾病则药效独特。EGb是目前得到银杏内酯的唯一途径，但受限于含量低、分离纯化困难和来源单一，难以在工业上大批量生产。

发明内容

针对银杏叶中银杏内酯A、C和白果内酯含量低，难以大批量生产应用的技术问题，本发明的目的是提供一种同时提升银杏叶中内酯A、C和白果内酯含量的促生制剂及其制备方法和应用。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

首先，本发明提供一种同时提升银杏叶中内酯A、C和白果内酯含量的促生制剂，所述促生制剂包括以重量份计的以下成分：尖孢镰刀菌4.5-6.5份、毛霉5.6-8.0份和尤韦可拟盘多毛孢15-25份。

优选地，所述促生制剂包括以重量份计的以下成分：尖孢镰刀菌6.5份、毛霉8.0份和尤韦可拟盘多毛孢25份。

其次，本发明提供一种上述促生制剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)在改良的PDA培养基上活化尖孢镰刀菌菌种，待菌丝长满培养基表面后打孔，将菌饼接入PDA培养液中，恒温震荡发酵培养6-8天，过滤菌丝球，保留滤液，即得所述尖孢镰刀菌；

(2)在PDA培养基上活化毛霉菌种，待菌丝长满培养基表面后打孔，将菌饼接入PDA培养液中，恒温震荡发酵培养8-10d，过滤菌丝球，保留滤液，即得所述毛霉；

(3)在PDA培养基上活化尤韦可拟盘多毛孢菌种，待菌丝长满培养基表面后打孔，将菌饼接入PDA培养液中，恒温震荡发酵培养9-11d，过滤菌丝球，保留滤液，即得所述尤韦可拟盘多毛孢；

(4)室温下，依次按配比在容器中添加尖孢镰刀菌、毛霉和尤韦可拟盘多毛孢，震荡均匀，即得所述促生制剂。

进一步地，所述步骤(1)中改良的PDA培养基的配方为：马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂15-20克，体积比为20％的银杏树皮提取液1000毫升，自然pH。

进一步地，所述银杏树皮提取液为200克银杏树皮在1升蒸馏水中煮沸0.5小时后去掉树皮制得。

进一步地，所述PDA培养基配方为：马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂15-20克，蒸馏水1000毫升，自然pH；所述PDA培养液配方为：马铃薯200克，葡萄糖20克，蒸馏水1000毫升，自然pH。

最后，本发明还提供一种上述促生制剂在提升银杏叶中内酯A、C和白果内酯含量中的应用。

进一步地，所述应用具体为：将促生制剂在银杏育苗或栽培的过程中施加到根部或叶片上。