[发明专利]一种快速检测庆大霉素高产菌株的分子生物学方法在审

专利信息
申请号: 202011547318.3 申请日: 2020-12-24
公开(公告)号: CN112553354A 公开(公告)日: 2021-03-26
发明(设计)人: 刘阳;张力支;葛祥斌;张卫;王议锋 申请(专利权)人: 福安药业集团烟台只楚药业有限公司
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12Q1/6858;C12Q1/04;C12N13/00;C12N15/01
代理公司: 济南誉琨知识产权代理事务所(普通合伙) 37278 代理人: 李照兰
地址: 264000 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 快速 检测 庆大霉素 高产 菌株 分子生物学 方法
【权利要求书】:

1.一种快速检测庆大霉素高产菌株的分子生物学方法,其特征在于,具体步骤如下:

(1)先将原始菌株诱变获得大量突变菌株,接着将原始菌株与突变菌株作为待测菌株一起测序获得多对有差异的微卫星标记;

(2)然后以待测菌株为模板DNA,步骤(1)所得微卫星标记为引物,进行菌落PCR扩增,扩增出大量特异性条带;

(3)经琼脂糖凝胶电泳检测,去除没有条带的菌落,确定初筛微卫星标记;

(4)另取原始菌株,诱变获得大量突变菌株,利用步骤(3)所得初筛微卫星标记作为引物,进行菌落PCR扩增,筛选出在突变菌株中具有特异性条带,在原始菌株中无特异性条带的,即为高产菌株。

2.根据权利要求1所述的分子生物学方法,其特征在于,步骤(1)中,采用常温等离子体物理诱变和氯化锂化学诱变相结合的方法进行诱变。

3.根据权利要求1所述的分子生物学方法,其特征在于,步骤(3)的具体方法为:经琼脂糖凝胶电泳检测,去除突变菌株和原始菌株均无条带或有条带的引物,留下突变菌株具有此条带,原始菌株无此条带,或者突变菌株无此条带,原始菌株有此条带的,即确定为初筛微卫星标记。

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