[发明专利]双水相萃取大豆乳清蛋白废水中脂肪氧合酶的工艺

说明书

本发明属于大豆乳清废水资源化利用技术领域，涉及一种双水相萃取大豆乳清蛋白废水中脂肪氧合酶的工艺。采用PEG6000‑(NH₄)₂SO₄双水相体系进行萃取。本发明提出PEG6000‑(NH₄)₂SO₄双水相萃取体系分离提取大豆乳清废水中LOX,并提出最优的提取条件，结合优化模型得以相互验证,本发明采用双水相萃取分离技术对大豆乳清废水中LOX进行分离，能降低废水中的COD和BOD，减少资源浪费及环境污染，实现大豆乳清废水高值化利用。

技术领域

本发明属于大豆乳清废水资源化利用技术领域，涉及一种双水相萃取大豆乳清蛋白废水中脂肪氧合酶的工艺。

背景技术

大豆乳清废水是利用碱溶酸沉工艺从低温脱脂豆粕中生产SPI所产生的副产物，有统计表明，生产1t SPI将产生35-65t的大豆乳清废水，而大豆乳清废水中含有丰富营养物质，且pH值显酸性极易腐败而造成严重污染。目前，大豆乳清废水的主要处理方法有厌氧法和好氧法，以降低废水中的COD值及BOD值，从而达到国家废水排放标准，但是高昂的处理成本严重降低了企业的生产效益和经济效益，并且废水中大量的活性物质未得到充分利用，因此，以资源化处理大豆乳清废水为研究目标，开发利用废水中的活性物质已成为研究热点之一。

目前，关于大豆乳清废水的最新研究较多集中于废水中活性蛋白质的回收利用，如Kunitz型胰蛋白酶抑制剂（Kunitz trypsin inhibitor, KTI）、大豆乳清蛋白及大豆异黄酮等。LOX氧化底物所产生的氢过氧化物衍生物是非常重要的药物合成和化学合成的中间体，如催化合成风味物质或药物中间体，也可应用于染料、洗涂剂的生产，而且在面制品加工中添加LOX可起到增白强筋的效果，由此可见， LOX在食品、医药、化工等领域具有广泛的应用前景。然而，有关利用现代分离技术提取大豆乳清废水中LOX的研究鲜有报道。由于通过微生物发酵或基因工程菌高效表达重组的LOX存在许多安全问题使其未曾应用于食品加工等行业，因此，开发绿色安全、高纯度、成本低的LOX是非常有必要的。

发明内容

本发明针对传统大豆乳清蛋白废水中脂肪氧合酶提取存在的问题提出一种新型的萃取大豆乳清蛋白废水中脂肪氧合酶的工艺。

为了达到上述目的，本发明是采用下述的技术方案实现的：

一种萃取大豆乳清蛋白废水中脂肪氧合酶的工艺,采用PEG6000-(NH₄)₂SO₄双水相体系进行萃取。

作为优选,萃取步骤为：大豆乳清废水冷冻离心后保留上清液；然后与PEG溶液、(NH₄)₂SO₄溶液及蒸馏水混合，得到萃取混合液，调节PH后静置；取下相(NH₄)₂SO₄溶液层进行离心，得到含有脂肪氧合酶的沉淀。

作为优选,所述萃取混合液中PEG6000质量分数为18-20%，(NH₄)₂SO₄质量分数10-12%，废水添加量18-25%，pH为5-6。

本发明提供萃取大豆乳清蛋白废水中脂肪氧合酶的工艺优化模型，公式如下：

Y%=85.68+1.04A+0.76B+1.27C+0.40AB-1.03AC+0.57BC-1.78A²-2.95B²-1.45C²；

P=3.19+0.15A+0.11B+0.15C-0.030AB-0.16AC+0.040BC-0.27A²-0.47B²-0.17C²；