[发明专利]一种大环内酰胺化合物FW05328-d及其高效发酵方法

说明书

本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种大环内酰胺化合物FW05328‑1的结构类似物FW05328‑d，并进一步公开一种利用氨基酸诱导高效发酵该结构类似物的方法。本发明所述大环内酰胺化合物FW05328‑d为已开发的大环内酰胺化合物FW05328‑1的结构类似物，所述化合物FW05328‑d在结构上比化合物FW05328‑1在10位上少一个‑OH，其物质结构及化学性能更为稳定，更加适宜于规模化生产。本发明所述大环内酰胺化合物FW05328‑d经抗肿瘤活性测试，证明该化合物具有抗小鼠黑色素瘤细胞株、人食管癌细胞株、人结肠癌细胞株活性，具有较好的医药价值。

技术领域

本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种大环内酰胺化合物FW05328-1的结构类似物FW05328-d，并进一步公开一种利用氨基酸诱导高效发酵该结构类似物的方法。

背景技术

随着医疗技术的不断进步，越来越多的医学难题得到攻克，人类寿命得到较大程度的延长。但是，癌症依然是人类需要克服的重大医疗难题之一，无论是在发达国家还是发展中国家，癌症都是死亡率最高的疾病，并且其发生率和死亡率仍不断增高。目前，癌症的主要治疗手段包括手术、放射性疗法以及抗肿瘤药物治疗，尤其是抗肿瘤药物治疗，随着全球癌症发病率的持续增长将推动抗肿瘤药物市场的快速发展。

在抗肿瘤药物的研发中，常常通过对已有的抗肿瘤化合物进行结构修饰获得结构类似物，以减轻毒性、提高选择性或扩大抗肿瘤谱，如顺铂(CDDP)自70年代成为抗肿瘤药物之后，人们开始尝试制备CDDP的衍生物以减轻其毒性和扩大抗癌谱，目前其衍生物第3代抗癌药物奥沙利铂已成为治疗晚期大肠癌的一线药物。同样，喜树碱的水溶性半合成衍生物Topotecan(TPT)和Irinotecan(CPT-11)已被开发为治疗卵巢癌和结肠癌的特效抗肿瘤药物。对已有抗肿瘤化合物的结构修饰可通过化学合成方法改造化合物，或通过合成生物学对化合物产生菌进行基因改造，从而获得新的化合物衍生物。但是，利用化学合成方法围绕核心骨架进行衍生化修饰有一定的瓶颈，且化学合成方法污染较大；而利用合成生物学方法改造化合物需具备一定的前提条件，如挖掘鉴定化合物的基因元件，并对化合物的生物合成途径进行解析。

大环内酰胺化合物FW05328-1化合物是福建省微生物研究所于2017年从海洋小单孢菌FIM05-328的微生物次级代谢产物中分离到一个新结构的26元多烯大环内酰胺类化合物，该化合物具有较为优良的抗人食管鳞癌细胞株活性(详见中国专利CN107287131A)。但由于其多烯类结构，FW05328-1性质不稳定，易发生结构转换和降解，已报道的大环内酰胺类化合物Micromonolactam、Salinilactam A也呈现出同样的性质，这给化合物FW05328-1的制备尤其是规模化制备带来较大的困难。因此，对于化合物FW05328-1的结构类似物的研究具有积极的意义。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种大环内酰胺化合物FW05328-1的结构类似物FW05328-d，所述化合物FW05328-d结构在10位上较FW05328-1少-OH，因而较FW05328-1具备更优的化学稳定性，抗肿瘤活性研究发现该化合物具有抗小鼠黑色素瘤细胞株、人食管癌细胞株、人结肠癌细胞株活性；

本发明所要解决的第二个技术问题在于提供一种基于氨基酸诱导高效发酵所述化合物FW05328-d的方法。

为解决上述技术问题，本发明所述的一种大环内酰胺化合物FW05328-d，其具有如下所示的结构：

本发明还公开了一种高效发酵所述大环内酰胺化合物FW05328-d的方法，包括将海洋小单孢菌接种于适宜发酵培养基中进行发酵培养的步骤；

所述海洋小单孢菌菌株，其分类命名为Micromonospora sp.FIM-MA181224，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO.17139。