[发明专利]用于检测人白介素23的ELISA试剂盒及检测方法

说明书

本申请提供了一种抗人白介素23单克隆抗体，及包含所述抗体的ELISA试剂盒及其检测方法。具体来说，本申请所述的ELISA试剂盒包括一对所述抗体，分别用作改良双抗体夹心ELISA方法中的包被抗体和检测抗体。本申请提供的试剂盒可完成人白介素23的定量检测，具有较高的检测灵敏度，开发及应用前景良好。

本案是申请日为2020年11月26日、申请号为202011347406.9、发明名称为“一种抗人白介素23及包含其的试剂盒及其检测方法”的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本申请属于免疫分析技术领域，涉及一种结合人白介素23的抗体和定量检测人白介素23的ELISA试剂盒，以及利用该试剂盒进行定量检测的方法。

背景技术

白细胞介素是一组具有重要作用的细胞因子，由免疫细胞或非免疫细胞产生，随着分子生物学和细胞生物学技术的迅速发展，目前至少发现了 38个白细胞介素，分别命名为IL-1～IL-38，功能复杂，成网络，复杂重叠；在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等一系列过程中均发挥重要作用，此外它们还参与机体的多种生理及病理反应。白介素23(IL-23) 是2000年发现的一种白细胞介素，目前已发现其具有多种生物学功能，并在多种疾病中发挥作用。

IL-23主要由活化的树突状细胞、巨噬细胞及单核细胞等产生，是IL- 12异源二聚体细胞因子家族中新的一员，主要由IL-23p19和IL-12/IL- 23p40两个亚基组成，其中IL-12/IL-23p40是其与IL-12共同含有的亚基。 IL-23p19与IL-12/IL-23p40两个亚基单独存在时，不具由生物学功能，只有二者相互连接形成同源二聚体，才能发挥生物学功能。

IL-23主要通过与其受体相互作用，激活下游信号通路发挥生物学功能。IL-23主要作用于Th17细胞，在Th17细胞的增殖与稳定中发挥重要作用，并能促进Th17细胞产生IL-23、IL-17F及IL-22等细胞因子，这些炎症因子作用于角质形成细胞，导致角质形成细胞活化和过度增殖。活化的角质形成细胞又通过产生大量细胞因子、趋化因子和抗菌肽等，募集并激活T细胞等免疫细胞，形成免疫应答的级联效应，引起银屑病损害的发生。IL-23在关节自身免疫炎症中，也是一个促进因子，如在风湿性关节炎中，IL-23促进IL-17的分泌，从而导致了关节的破坏。因此，在临床治疗的过程中，检测患者血清中IL-23水平及其变化情况具有非常重要的意义。

目前市场上测定白介素23含量的试剂盒产品类型少，且价格昂贵。本发明中的ELISA试剂盒可定量检测细胞培养基中白介素23的含量，操作简单方便，灵敏度高，且具有良好的特异性，对白介素23相关的自身免疫性疾病的发病机制以及药物模型等的研究具有重要的意义。

发明内容

基于上述现有技术中存在的问题，本发明提供了一种针对人白介素23 的高亲和力基于改良双抗体夹心ELISA方法研制的人白介素23ELISA试剂盒，该试剂盒包含一对抗人白介素23单克隆抗体。利用该试剂盒可实现对人白介素23的定量检测。

具体来说，本发明涉及以下内容：

1.一种分离的抗人白介素23单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体包含三个重链互补决定区(CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3)和三个轻链互补决定区(CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3)，其中：

a)CDR-H1(在本说明书中CDR-H1表示重链CDR1)的氨基酸序列如SEQ ID No:1(SYWMN)或SEQ ID No:2(SYGIS)所示；

b)CDR-H2(在本说明书中CDR-H2表示重链CDR2)的氨基酸序列如SEQ ID No:3(YIIPITGYTEYNQKFKD)或SEQ ID No:4 (KISPRSVNAYYNEKFKG)所示；