[发明专利]一种壳多糖酶3样蛋白1测定试剂盒

说明书

本发明公开了一种壳多糖酶3样蛋白1测定试剂盒，涉及生物分析技术领域，包括试剂R1和试剂R2；试剂R1包含：柠檬酸钠50～300mmol/L、氯化钠0.05～0.5mol/L、防腐剂0.02～5％，试剂R2包含：柠檬酸钠50～300mmol/L、牛血清白蛋白0.5～5％、吐温200.2～2％、防腐剂0.02～5％、包被有抗壳多糖酶3样蛋白1抗体胶乳颗粒0.5％～5％。本发明的有益效果是本发明的试剂盒具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点，能够应用于各种全自动生化分析仪进行大批量的测定，适于在临床推广，降低医院检测成本。

技术领域

本发明属生物分析技术领域，具体涉及一种壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)高效测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)。

背景技术

壳多糖酶3样蛋白1(Chitinase-3-like 1，CHI3L1)属于糖基水解酶家族18，多种细胞可以表达分泌CHI3L1，如巨噬细胞、中性粒细胞、软骨细胞、成纤维细胞、肿瘤细胞和呼吸道上皮细胞。CHI3L1能够参与炎症、细胞增殖和分化、保护细胞凋亡、促进血管生成及细胞外基质重构等病理过程。CHl3Ll在肝脏中的表达水平远远高出其他组织，是肝特异性或高度肝富集基因，CHl3L1是一个很好的肝脏纤维化血清学指标，来区分慢性乙型肝炎(CHB)和肝硬化。

目前，临床上诊断肝硬化常用组织病理学检查、血清学诊断以及影像学诊断等方法。但以上检测方法都有低灵敏度和特异性差的缺陷，造成诊断出现很高的假阳性和假阴性。因此，准确且高效地测定CHI3L1，在肝硬化疾病的诊断中起着至关重要的作用。

发明内容

本发明的目的在于至少解决现有技术中存在的技术问题之一，提供一种利用胶乳免疫比浊方法体外定量测定人血清中壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)含量的试剂盒，以解决现有技术中的检测方法低灵敏度和特异性差的缺陷。

本发明的技术解决方案如下：

一种壳多糖酶3样蛋白1测定试剂盒，包括试剂R1和试剂R2；

所述试剂R1包含：

柠檬酸钠 50～300mmol/L

氯化钠 0.05～0.5mol/L

防腐剂 0.02～5％

所述试剂R2包含：

在本发明的一个具体实施方式中，

所述试剂R1包含：

柠檬酸钠 100mmol/L

氯化钠 0.15mol/L

防腐剂 0.03％

所述试剂R2包含：

在本发明的一个具体实施方式中，所述包被有抗壳多糖酶3样蛋白1抗体胶乳颗粒的制备方法包括：将胶乳微球加入第一反应缓冲液中，混合均匀后加入第二反应缓冲液，在28～37℃下混合，得到胶乳微球溶液；然后往胶乳微球溶液中加入壳多糖酶3样蛋白1抗体，在28～37℃下反应60～120min；继续加入EDC.HCI溶液和NHS溶液，在28～37℃下搅拌60～120min；继续加入封闭液，在28～37℃下搅拌60～120min，然后离心，继续加入储存缓冲液，在28～37℃下搅拌60～120min，使颗粒完全分散，过夜保存，得到包被有抗壳多糖酶3样蛋白1抗体胶乳颗粒。

在本发明的一个具体实施方式中，所述乳胶微球的浓度为1～2％，胶乳微球粒径为150～300nm，羧基密度80～150％。优选地，所述乳胶微球的粒径为250nm。