[发明专利]一种测定日落黄中1-苯基偶氮基-2-萘酚含量的方法

说明书

本发明涉及一种测定日落黄中1‑苯基偶氮基‑2‑萘酚含量的方法，所述的方法为高效液相色谱法，流动相：A乙酸铵溶液、B甲醇；浓度梯度：50min线性浓度梯度从A‑80%比B‑20%至A‑10%比B‑90%；色谱系统：长为150mm，内径为4.6mm的不锈钢柱，固定相为C18、粒径5μm；检测波长为382nm；流速为1mL/min；柱温40℃。该方法操作简便、专属性强、灵敏度高、重复性好。

技术领域

本发明涉及一种萘酚-磺酸类化合物，尤其涉及一种萘酚-磺酸类化合物的检测方法。

背景技术

日落黄（Sunset Yellow），6-羟基-5-[(4-磺酸基苯基)偶氮]-2-萘磺酸的二钠盐，俗称晚霞黄、夕阳黄、橘黄、食用黄色3号等，化学式为C16H10N2Na2O7S2，CAS号2783-94-0，结构式如下：

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日落黄为橙红色颗粒或粉末，无臭。耐光、耐热性（205℃）强，易吸湿。易溶于水，0.1%水溶液呈橙黄色；溶于甘油、丙二醇，微溶于乙醇，不溶于油脂。在柠檬酸、酒石酸中稳定，耐酸性强；遇碱橙红褐色，耐碱性尚好；还原时退色。最大吸收波长482nm±2nm。

本品可用作药品或食品的着色剂，最大使用量为0.1g/Kg。

现有技术研究表明，在合成日落黄的过程中，不可避免会生成一些杂质，其中就包括1-苯基偶氮基-2-萘酚。1-苯基偶氮基-2-萘酚，又名苏丹-1，分子式C16H12N2O，CAS号842-07-9，结构式如下：

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因为最终要施用到人体上，因此本领域对控制药物原料的质量控制有着非常严苛的要求，其中就包括控制药用辅料的质量。如前所述，日落黄作为常用的药用辅料，检测其中杂质的含量对控制其质量有着重要的意义。现有技术中（如中国药典2020版四部）并没有披露具体的方法，因此，如何检测日落黄中1-苯基偶氮基-2-萘酚的含量是一个亟待解决的技术难题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种测定日落黄中1-苯基偶氮基-2-萘酚含量的方法，该方法操作简便、专属性强、灵敏度高、重复性好，可以用来检测日落黄的质量。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

所述的方法为高效液相色谱法。

优选的，所述的方法具体如下：

稀释液：甲醇和2g/L乙酸铵溶液的混合液；

流动相：A乙酸铵溶液、B甲醇；浓度梯度：50min线性浓度梯度从A-80%比B-20%至A-10%比B-90%；

标准品溶液：称取0.01g已置于真空干燥器中干燥 24h后的1-苯基偶氮基-2-萘酚，用甲醇溶解，移入1000mL容量瓶中，以稀释液定容；吸取10mL上述溶液，以稀释液定容至1000mL,然后吸取 0.5-1.5mL，以稀释液定容至 100mL作为标准品溶液；

供试品溶液：取日落黄0.1g，加2g/L乙酸铵溶液溶解，稀释至100mL，此为试样溶液；

色谱系统：长为150mm，内径为4.6mm的不锈钢柱，固定相为 C18、粒径5μm；检测波长为382nm；流速为1mL/min；柱温40℃；

测定法：取标准品溶液与供试品溶液各20μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图并测量主峰响应值，按下式计算日落黄中1-苯基偶氮基-2-萘酚的百分含量：含量=(ru/rs)×(Cs/Cu)×100，式中Cs为标准品溶液中5-苄基3,6-二氧-2-哌嗪乙酸的浓度，单位为mg/mL；Cu为供试品溶液中日落黄的浓度，单位为mg/mL；ru与rs为1-苯基偶氮基-2-萘酚在供试溶液与标准溶液中的峰面积。

优选的，所述稀释液中甲醇和2g/L乙酸铵溶液的混合液的体积比为1:1。