[发明专利]芽孢杆菌GN02及其产右旋糖酐酶的方法与用途

说明书

本发明公开了一种来自海洋的芽孢杆菌（Bacillus sp.）GN02，其菌种保藏号为CGMCC No.20951。本发明还公开了芽孢杆菌GN02产右旋糖酐酶的方法，将芽孢杆菌GN02接种到A01培养基中，转数180 rpm，装液量20%，35℃培养12 h得到种子液；将种子液以2%的接种量接种于产酶培养基中，180 rpm，25℃培养36 h，12000 rpm,离心5 min，取上清液即为右旋糖酐酶粗酶。本发明提供了一种新的能产右旋糖酐酶的芽孢杆菌，丰富了产右旋糖酐酶的海洋细菌品种。且产酶方法简单，可操作性强，所产右旋糖酐酶的最适作用温度为20℃，在20℃至45℃范围内都有较高催化活力，且热稳定性好，酶在pH 5.0～9.0的范围内稳定。

技术领域

本发明涉及一种微生物，特点是一株分离自中国江苏省连云港市高公岛海泥中的芽孢杆菌（Bacillus sp.）GN02；菌种保藏号：CGMCC No. 20951；本发明还涉及该菌株产右旋糖酐酶的方法与用途。

背景技术

右旋糖酐酶专一水解α-1,6糖苷键，主要应用在食品、制糖、医药行业。如甘蔗制糖中添加右旋糖酐酶可以降低糖汁黏度，提高蔗糖质量，降低生产成本。同时还具有清除牙菌斑、预防龋齿的作用。

近年来，酶法降解制备益生元（低聚寡糖）具有广阔的前景。与化学和物理法相比，酶法具有反应条件温和、产物均一性好、聚合度适中、得率高、无污染、保护产物的活性基团等优点。内切右旋糖酐酶水解右旋糖酐的产物主要为异麦芽寡糖。因此，研究新的能产右旋糖酐酶的海洋细菌具有重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的问题是针对现有技术的不足，提供一种新的能产右旋糖酐酶的来自海洋的芽孢杆菌（Bacillus sp.）GN02。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供上述芽孢杆菌GN02的产右旋糖酐酶方法及应用。

本发明所要解决的技术问题可以通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种来自海洋的芽孢杆菌（Bacillus sp.）GN02，其菌种保藏号为CGMCC No. 20951。本发明的芽孢杆菌GN02菌株是在中国江苏省连云港市连云区高公岛的海泥中分离得到的。

本发明还公开了芽孢杆菌（Bacillus sp.）GN02产右旋糖酐酶的方法，其步骤如下：将芽孢杆菌GN02接种到A01培养基中，转数180 rpm，装液量20%，35℃培养12 h得到种子液；将种子液以2% 的接种量接种于产酶培养基中，180 rpm，25℃培养36 h，12000 rpm, 离心5 min，取上清液即为右旋糖酐酶粗酶；

A01培养基的组成为：酵母粉0.5%，胰蛋白胨1%，0.0005%柠檬酸铁 陈海水配制pH7.6；

所述的产酶培养基的组成为：酵母粉0.1%，鱼粉蛋白胨0.5%，右旋糖酐T20 10 g/L，pH 8.0。

本发明芽孢杆菌（Bacillus sp.）GN02所产的右旋糖酐酶的用途为将所产右旋糖酐酶用于水解右旋糖酐用于低聚异麦芽寡糖生产制备。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1、本发明提供了一种新的能产右旋糖酐酶的芽孢杆菌（Bacillus sp.）GN02，丰富了产右旋糖酐酶的海洋细菌品种。该菌株具有以下特征：生长温度范围为20-40℃，生长初始pH范围为5.0-10.0。芽孢杆菌GN02最适生长温度为35℃，最适生长初始pH为7.0。