[发明专利]石斛中10种有效成分的含量检测方法

说明书

本发明公开了一种石斛中10种有效成分的含量检测方法，该方法采用超高效液相色谱‑质谱联用方法进行检测，色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，流动相由乙腈A和0.1％甲酸水溶液B组成，采用梯度洗脱方式洗脱；质谱用MRM模式进行检测。本发明的方法快速、准确、重现性好。

技术领域

本发明涉及一种石斛中10种有效成分的含量检测方法。

背景技术

石斛(Dendrobium nobile Lindl.)为兰科石斛属植物，生于密林中树干上或山谷阴湿岩石上，主要分布在我国的广西省、贵州省和云南省，具有益胃生津，滋阴清热等功效，临床用于治疗阴伤津亏，口干烦渴，食少干呕，病后虚热，目暗不明等症。市面上售卖的石斛种类、产地、年限不明，其质量检测方法对于选择品质高的石斛十分重要，然而目前石斛的质量检测方法还未见报道。对于石斛，现有文献仅报道了超高效液相色谱-质谱联用方法测定其中多种酚类成分的方法。对石斛中的联苄类、菲类等成分并未进行统一的分析。

因此，需要一种能够更全面地衡量石斛质量的检测方法。

发明内容

本发明提供一种石斛中10种有效成分的含量检测方法，该方法能够同时检测石斛中10种有效成分，从而更全面地衡量石斛的质量。

本发明提供石斛中10种有效成份的含量检测方法，采用超高效液相色谱-质谱联用方法进行检测，其中，超高效液相色谱条件包括：

色谱柱，采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；

流动相由乙腈A和0.1％甲酸水溶液B组成，洗脱方式为：

0→T1，流动相中乙腈的体积百分比由A1增加至A2；

T1→T2，流动相中乙腈的体积百分比由A2增加至A3；

T2→T3，流动相中乙腈的体积百分比由A3增加至A4；

T3→T4，流动相中乙腈的体积百分比由A4增加至A5；

T4→T5，流动相中乙腈的体积百分比由A5增加至A6；

其中，T1为2～6min，T2为4～8min，T3为5～10min，T4为7～12min，T5为9～14min；A1为8％～12％，A2为22％～30％，A3为36％～49％，A4为63％～80％，A5为80％～95％，A6为90％～99％；所述乙腈的体积百分比均以流动相的总体积为基准。

其中，所述10种有效成分为香草酸，丁香酸，牡荆素，2,4,7-三羟基-9,10-二氢菲，7,4'-二羟基黄酮，甘草素，丁香脂素，柚皮素，石斛酚，毛兰素。

其中，质谱用MRM模式进行检测，雾化气(GS1)、加热气(GS2)、气帘气(CUR)和碰撞气为氮气，参数如下：GS1，45psi；GS2，45psi；雾化温度，300℃。离子喷射针电压，正离子模式4500V，负离子模式-3500V。去簇电压(DP)135V。10种有效成分的离子对、碰撞能量为：

其中，每个化合物都用两个离子对进行检测，加粗的离子对用来定量。

其中，C1为-5～-15eV，C2为-15～-30eV，C3为-10～-25eV，C4为-15～-25eV，C5为-15～-30eV，C6为-35～-45eV，C7为-15～-35eV，C8为-35～-45eV，C9为-25～-45eV，C10为-15～-25eV，C11为-25～-35eV，C12为-5～-15eV，C13为15～25eV，C14为15～35eV，C15为-5～-20eV，C16为-25～-35eV，C17为-25～-35eV，C18为-10～-15eV，C19为15～25eV，C20为10～20eV。