[发明专利]一种左乙拉西坦衍生物、免疫原、抗左乙拉西坦特异性抗体及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种左乙拉西坦衍生物、免疫原、抗左乙拉西坦特异性抗体及其制备方法与应用。首先将新型左乙拉西坦衍生物与经过基因工程改造得到的重组鸭卵清白蛋白偶联制得左乙拉西坦人工抗原，再用左乙拉西坦人工抗原免疫实验动物获得抗左乙拉西坦特异性抗体，经ELISA检测表明该特异性抗体的特异性强、灵敏度高，干扰实验显示该特异性抗体与100种常见药物无任何交叉反应；将抗左乙拉西坦特异性抗体应用于制备左乙拉西坦检测试剂，包括左乙拉西坦均相酶免疫检测试剂与左乙拉西坦胶乳增强免疫比浊检测试剂，所述检测试剂可以实现在全自动生化分析仪上对左乙拉西坦的高通量、快速化检测。

技术领域

本发明涉及一种左乙拉西坦衍生物、免疫原、抗左乙拉西坦特异性抗体及其制备方法与应用，属于生物医学检测技术领域。

背景技术

左乙拉西坦（leve-tiracetam，LEV）是一种新型抗癫痫药物（AED），左乙拉西坦的化学名称为(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺，由S-2-氨基丁酰胺盐酸盐和4-氯丁酰氯为起始原料，经环合反应得环合物（左乙拉西坦粗品），对粗品精制得到终产品左乙拉西坦，其分子式为：C8H14N2O2，相对分子量为：170.21。主要通过选择性抑制癫痫样突发放电超同步性和癫痫发作的传播而发挥疗效，属于吡咯烷酮衍生物。我国国家食品药品监督管理局批准的适应症为：用于成人及4岁以上儿童癫痫患者部分性发作的添加治疗。本品具有生物利用度高、药动学呈线性、蛋白结合率低、肝脏代谢少、能快速获得稳定血药浓度和药物相互作用小等特点，是临床用药较安全的药物。

左乙拉西坦剂量与血药浓度相关性良好，超过12h采血，左乙拉西坦剂量与血药浓度相关性差。由于肾功能不全对左乙拉西坦的清除率有关，因此应针对肾功能不全患者调整左乙拉西坦的用药剂量。无论是左乙拉西坦单独使用，还是与其他药物联合使用，其血药浓度不受联合用药影响；左乙拉西坦药物不良反应多发生于用药初期，如：嗜睡、睡眠不佳、烦躁、易怒、食欲不佳、恶心呕吐、腹痛、腹泻等。耐受后多数症状可自行缓解，无严重药物不良反应发生。左乙拉西坦在儿童体内消除速率快，半衰期短，用药依从性差，且癫痫患儿需长期服药，因此在儿科临床用药时，通过对左乙拉西坦的血药浓度进行监测，可为患儿提高疗效、服药依从性和观察特殊状态药代动力学（肾功能异常、老人、孩子、孕妇等）提供依据。因此左乙拉西坦的血药浓度与服药剂量和种类及患者的个体差异都有很大关系，需要在治疗过程中进行血药浓度监测以便更好的控制癫痫。

左乙拉西坦的血药浓度检测方法有多种，包括液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)、高效液相色谱法（HPLC）等。液相色谱-串联质谱法可大大简化样品纯化过程，且结果不受左乙拉西坦代谢产物的干扰，线性范围广、定量下限低，但对试验的要求较高，其前处理较为复杂，条件不易控制。高效液相色谱法具有准确、灵敏、廉价的特点，但测定时间较长，测定结果中常常包含代谢物浓度，且该方法检测浓度有限，操作繁琐、重现性较差，难以实现自动化监测，制约了其在临床检测上的大规模使用。

因此，目前市面上缺乏线性范围宽、灵敏度高、准确度高、精密度高，检测时间短，样品处理简单，仪器自动化程度高，可多样本连续检测的左乙拉西坦检测产品。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的第一个目的在于提供一种左乙拉西坦衍生物，该衍生物为新合成的化合物，自然界中不存在。

本发明的第一个目的采用以下技术方案实现：一种左乙拉西坦衍生物，其结构式如式Ⅰ所示：

式Ⅰ。

本发明的第二个目的在于提供一种如上所述的左乙拉西坦衍生物的合成方法，该合成方法不同于常规合成方法，具有良好的合成效果，显著提高了左乙拉西坦衍生物的合成效率。

本发明的第二个目的采用以下技术方案实现：一种如上述结构式Ⅰ所示的左乙拉西坦衍生物的合成方法，反应过程如下式所示：

；

具体的，反应过程包括以下步骤：

（A1）化合物2的合成：