[发明专利]槟榔碱协同薄荷醇诱导形成条件性位置偏爱动物模型的方法及应用

说明书

本发明公开了槟榔碱协同薄荷醇诱导形成条件性位置偏爱动物模型的方法和应用，属于动物模型构建技术领域。本发明基于目前尚缺乏理想的槟榔碱协同薄荷醇的CPP依赖模型的技术问题，从槟榔的多种有效成分中筛选得到了可构建CPP动物模型的槟榔碱，并将其与薄荷醇配合，进一步调节二者的给药量使其发挥协同增效作用，成功构建得到了一种稳定且重现性好的CPP动物模型，其不仅可用于评价槟榔碱协同薄荷醇的依赖性，也更有利于进一步探索槟榔碱协同薄荷醇诱导依赖的神经生物学机制，为开展早期干预及治疗提供理论依据。本发明所述的方法操作简单方便、省时省力，适合实验室大规模广泛应用。

技术领域

本发明属于动物模型构建技术领域，具体涉及槟榔碱协同薄荷醇诱导形成条件性位置偏爱动物模型的方法及应用。

背景技术

槟榔为棕榈科植物槟榔Areca catechu L.的干燥成熟种子，主产于印度尼西亚、马来西亚及中国的广东、海南、广西和云南等地。随着槟榔产业的不断发展，槟榔不仅仅局限于药用，更多地被应用到食品产业中。据统计世界上约有6亿人嚼食槟榔，嚼食槟榔时能使人产生轻微的兴奋性和欣快感，同时缓解精神紧张达到提神的作用，而长期嚼食会导致一定的依赖性。而薄荷醇是用于槟榔制品产生清凉效果且药性不强的化学物质，其作为槟榔制品的重要添加剂，能掩盖槟榔苦涩味，使感觉清新，提高槟榔咀嚼的柔和性、降低口腔和喉部刺激，因此在槟榔制品工业化应用广泛，而薄荷醇的加入会进一步增强对槟榔的依赖性。槟榔依赖是一种以失去自我控制、强迫性反复用药为特征的慢性复发性脑疾病，符合世界卫生组织归纳的依赖行为特征。2003年世界卫生组织认定槟榔为一级致癌物，长期嚼食会增加口腔癌等多种肿瘤的患病风险。

条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)动物行为学模型是临床前评价药物依赖潜力的主要方法之一。现有专利CN111165428A公开了一种嚼食槟榔成瘾的动物模型的构建方法及其应用，其主要是提取槟榔嚼块的提取液涂抹于饲料表面基于实验线束采食以用于评价实验动物嚼食槟榔成瘾的动物模型。然而根据目前的研究，已在槟榔中鉴定出了包括槟榔碱、槟榔次碱、异槟榔碱，去甲基槟榔碱等15种生物碱，因此仅以槟榔嚼块提取液构建动物模型无法明确其中具体是哪种物质诱导成瘾，不利于槟榔成瘾的神经生物学机制研究；并且以该方法构建得到的动物模型无法用于槟榔碱协同薄荷醇诱导依赖的神经生物学机制研究中，同时该模型的构建方法中槟榔嚼块提取液的制备步骤操作复杂且繁琐费时。

发明内容

本发明基于目前尚缺乏理想的槟榔碱协同薄荷醇的CPP依赖模型的技术问题，从槟榔的多种有效成分中筛选得到了可构建CPP动物模型的槟榔碱，并将其与薄荷醇配合，进一步调节二者的给药量使其发挥协同增效作用，成功构建得到了一种CPP动物模型，该动物模型不仅可用于评价槟榔碱协同薄荷醇的依赖性，也更有利于进一步探索槟榔碱协同薄荷醇诱导依赖的神经生物学机制，并且该动物模型的构建方法简单省时、重复性好、无需联用其他药物。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

槟榔碱协同薄荷醇诱导形成条件性位置偏爱动物模型的方法，所述方法包括：将槟榔碱和薄荷醇依次给予限饲中的实验动物，接着进行条件性位置偏爱训练，训练结束后对所述实验动物进行检测，得到条件性位置偏爱动物模型；

其中所述槟榔碱和所述薄荷醇的给予量为：按照实验动物的体重给予槟榔碱0.03～0.1mg/kg，薄荷醇1mg/kg。

进一步的，所述槟榔碱和所述薄荷醇的给予量为：按照实验动物的体重给予槟榔碱0.03mg/kg，薄荷醇1mg/kg。

进一步的，所述槟榔碱和所述薄荷醇的给药方式为腹腔注射。

进一步的，所述槟榔碱和所述薄荷醇的给药间隔时间为5min。