[发明专利]一种提高水稻抗白叶枯病的方法有效
申请号: | 202011568695.5 | 申请日: | 2020-12-25 |
公开(公告)号: | CN113403308B | 公开(公告)日: | 2022-10-21 |
发明(设计)人: | 刘慧丽;朱广琦;黄美玲;董孟格;梁玮;陶利珍 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 段卉 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 水稻 抗白叶枯病 方法 | ||
1.一种提高水稻抗白叶枯病的方法,其特征在于,利用CRISPR技术敲除水稻OsRLK1基因,或使得OsRLK1基因失活,使得OsRLK1蛋白失活;所述OsRLK1基因的核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示;所述OsRLK1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;
所述CRISPR技术敲除的靶点序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将所述靶点序列连入由U6a启动子启动的Cas9载体中,获得打靶载体;通过农杆菌介导的遗传转化体系将所述打靶载体导入野生型水稻植株中,筛选和/或鉴定获得阳性转基因植株。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,利用核苷酸序列如SEQ ID NO:5~6所示的引物进行筛选和/或鉴定。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,通过Cas9载体的抗性进行筛选和/或鉴定阳性植株。
5.靶点序列通过CRISPR技术构建抗白叶枯病水稻或构建OsRLK1基因缺失水稻中的应用;
所述OsRLK1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;
所述靶点序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:3~4所示。
6.OsRLK1基因和/或OsRLK1蛋白的抑制剂在提高水稻的白叶枯病抗性中的应用;
所述OsRLK1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述OsRLK1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;
所述抑制剂为利用CRISPR敲除RLK1基因的抑制剂;
所述CRISPR敲除的靶点序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。
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