[发明专利]亲和层析柱及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种亲和层析柱，其特征在于，所述亲和层析柱的固定相主要由变性剂处理后的含氨基配体的生物大分子、溴化氰活化琼脂糖层析填料和表面活性剂经偶联孵育反应制备得到；

所述表面活性剂为质量浓度0.5～1％的十二烷基肌氨酸钠溶液；

所述亲和层析柱的固定相中溴化氰活化琼脂糖层析填料用量在0.1-0.3g，因为其是干粉状态，称量后，先用1mM稀盐酸使得琼脂糖吸水膨胀为均一状态，然后替换到偶联缓冲液中，偶联缓冲液加上待偶联的蛋白溶液，体积在10ml，然后加入十二烷基肌氨酸钠，十二烷基肌氨酸钠的终浓度在0.5-1％。

2.根据权利要求1所述的亲和层析柱，其特征在于，所述含氨基配体的生物大分子包括蛋白、多肽和抗体中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的亲和层析柱，其特征在于，所述变性剂处理的变性剂包括尿素、盐酸胍和二甲基甲酰胺中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的亲和层析柱，其特征在于，所述亲和层析柱的固定相中变性剂处理后的含氨基配体的生物大分子的用量为1～5mg，所述溴化氰活化琼脂糖层析填料的用量为0.1～0.3g。

5.一种根据权利要求1～4任一项所述的亲和层析柱的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

将变性剂处理后的含氨基配体的生物大分子、溴化氰活化琼脂糖层析填料和表面活性剂在层析柱空柱中进行偶联孵育反应得到具有固定相的反应柱，随后对反应柱依次进行洗涤和封闭处理，得到亲和层析柱。

6.根据权利要求5所述的亲和层析柱的制备方法，其特征在于，所述偶联孵育反应包括将变性剂处理后的含氨基配体的生物大分子、溴化氰活化琼脂糖层析填料和表面活性剂混匀后轻摇反应1～2h。

7.根据权利要求6所述的亲和层析柱的制备方法，其特征在于，所述封闭处理的封闭液为Tris-HCl溶液。

8.一种根据权利要求1～4任一项所述的亲和层析柱在生物大分子分离纯化中的应用。

9.根据权利要求8所述的亲和层析柱在生物大分子分离纯化中的应用，其特征在于，所述生物大分子包括抗体或蛋白。