[发明专利]Aldosterone重组兔单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及抗体技术领域，尤其涉及Aldosterone重组兔单克隆抗体及其应用。本发明利用噬菌体展示技术，筛选获得了本发明所述的Aldosterone重组兔单抗，其重链可变区具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；其轻链可变区具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。该单抗特异性强，检测灵敏度高，解决了醛固酮在样本中含量低、检测难度大的问题。经鉴定，利用该单抗进行重复多次检测，稳定性良好，准确性高。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，尤其涉及Aldosterone重组兔单克隆抗体及其应用。

背景技术

醛固酮(Aldosterone)含量检测主要用于筛查原发性Aldosterone增多症(原醛症)引起的继发性高血压患者，该类患者占总高血压患者的5%～15%。与原发性高血压患者相比，原醛症患者心、脑等靶器官损害更为严重，故早期诊断至关重要。目前，检测血清或血浆中肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AⅡ)和Aldosterone三个临床指标是原发性和继发性高血压分型诊断、治疗及研究的重要指标。另外，大量临床研究表明，Aldosterone升高是慢性心率衰竭发生发展的重要致病机制，它可以促进储钠排钾、激活交感神经，并促进心肌和血管壁外纤维化。

Aldosterone与血浆中白蛋白结合能力很差，与血浆皮质类固醇结合球蛋白相结合很少，大部分以游离形式存在，更新速度较快。每100 ml外周血中约含有8 ngAldosterone，含量微小，却能表现较为强大的生理功能。Aldosterone在血液中的含量甚微，给临床的定量检测带来巨大挑战，目前临床多通过抗原抗体反应的免疫分析方法检测血清中的Aldosterone。

1985年，美国Missouri大学的Smith G P建立了噬菌体展示技术(phagedisplaytechnology)。噬菌体展示技术是将外源DNA通过基因工程技术克隆到适当的噬菌体载体上，使外源DNA片段对应的表达产物融合在噬菌体的衣壳蛋白上形成融合蛋白，呈现在噬菌体表面，被展示的多肽或蛋白可保持相对的空间结构和生物活性。然后利用靶分子，采用适当的淘洗方法洗去非特异结合的噬菌体，最终从噬菌体文库中筛选出能结合靶分子的目的噬菌体。噬菌体展示技术不仅是一个高效筛选体系，也是一个体外成熟过程，通过抗体基因库技术和噬菌体展示技术有可能获得亲和力和特异性得到改善的单克隆重组抗体。利用噬菌体展示技术提高Aldosterone抗体的性能，解决Aldosterone的检测问题，是本领域亟待解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供Aldosterone重组兔单克隆抗体及其应用，该重组抗体能快速、灵敏的检测患者血清中醛固酮的浓度。

本发明提供的Aldosterone重组兔单克隆抗体，其重链可变区具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；其轻链可变区具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

本发明所述的单克隆抗体，还包括恒定区，所述重链的恒定区为兔的 IgG1；所述轻链的恒定区为κ型。

本发明利用噬菌体展示技术，筛选获得了本发明所述的Aldosterone重组兔单抗，该单抗特异性强，检测灵敏度高，解决了醛固酮在样本中含量低、检测难度大的问题。经鉴定，利用该单抗进行重复多次检测，稳定性良好，准确性高。

本发明还提供了编码所述的单克隆抗体的核苷酸。

本发明提供了编码所述单克隆抗体重链的核苷酸序列。

本发明提供了编码所述单克隆抗体轻链的核苷酸序列。

本发明提供了编码所述单克隆抗体重链可变区的核苷酸序列。

其中，编码所述单克隆抗体重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示或为SEQID NO:3的互补序列。