[发明专利]用于乙肝病毒检测的DNA聚合酶混合物有效
| 申请号： | 202011577083.2 | 申请日： | 2020-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN112779237B | 公开（公告）日： | 2023-06-30 |
| 发明（设计）人： | 蒋析文;刘霭珊;连献兰 | 申请（专利权）人： | 广州达安基因股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12Q1/686;C12Q1/70;C12R1/93 |
| 代理公司： | 上海助之鑫知识产权代理有限公司 31328 | 代理人： | 陈详 |
| 地址： | 510665 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 乙肝病毒 检测 dna 聚合 混合物 | ||
1.一种用于乙肝病毒检测的DNA聚合酶混合物，其特征在于，所述DNA聚合酶混合物由野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶组成；其中，所述野生型DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.:2所示；
所述突变型DNA聚合酶为突变体1：在SEQ ID NO.:2所示的野生型DNA聚合酶基础上进行突变，并且所述突变体1的突变位点为：E507A、K508L、E734E、F749K；并且，所述DNA聚合酶混合物中野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶的酶活比例为3～7：7～3。
2.如权利要求1所述的DNA聚合酶混合物，其特征在于，所述DNA聚合酶混合物中野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶的酶活比例为3：7。
3.如权利要求1所述的DNA聚合酶混合物，其特征在于，所述DNA聚合酶混合物中野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶的酶活比例为4：6。
4.如权利要求3所述的DNA聚合酶混合物，其特征在于，所述DNA聚合酶混合物中野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶的酶活比例为5：5。
5.如权利要求4所述的DNA聚合酶混合物，其特征在于，所述DNA聚合酶混合物中野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶的酶活比例为6：4。
6.如权利要求3所述的DNA聚合酶混合物，其特征在于，所述DNA聚合酶混合物中野生型DNA聚合酶和突变型DNA聚合酶的酶活比例为7：3。
7.一种用于乙肝病毒检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的DNA聚合酶混合物。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含PCR缓冲液、逆转录酶、和/或dNTP。
9.一种非诊断目的用于乙肝病毒检测的PCR扩增方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
(1)提供待检测对象的核酸样本；
(2)制备PCR反应体系并进行PCR反应：
其中，所述步骤(2)中，使用权利要求1所述的DNA聚合酶混合物催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述核酸样本中包含乙肝病毒cDNA。
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