[发明专利]依托度酸原料药中一个微量杂质的分离制备方法

说明书

本发明公开了一种依托度酸原料药中一个微量杂质的分离制备方法，微量杂质的分子式为C₂₉H₃₄N₂O₃，采用梯度洗脱的高速逆流色谱法对依托度酸原料药中的微量杂质进行分离制备；逆流色谱法的溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：乙醇：水；洗脱模式为梯度洗脱；通过紫外检测器的在线监测，收集、合并目标流分并旋转蒸发至干，得微量杂质。采用本发明的方法便于对依托度酸系列产品进行质量控制。

技术领域

本发明属于药物杂质研究技术领域，具体涉及高速逆流色谱法从依托度酸原料药中分离制备一个微量杂质的方法。

背景技术

药物生产过程中常需加入试剂、溶剂或催化剂，由于溶解度、吸附、吸留、共沉淀、混晶生成等原因，不可能完全除去，使产品中存在有关杂质。如使用酸性或碱性试剂处理后，可能使产品中带有酸性或碱性杂质；用有机溶剂提取或精制后，在产品中就可能有残留有机溶剂。中国药典中规定必须检查药物在生产过程中引入的有害有机溶剂(如苯、氯仿、1,4-二氧六环、二氯甲烷、吡啶等)的残留量。药物的杂质与药品安全性的关系是一个受很多因素影响的复杂的关系，通常药物中的杂质大多具有潜在的生物活性，有的甚至与药物相互作用从而影响药物的效能和安全性，严重的可能产生毒性作用。为达到进一步评价药物毒、副作用及避免不良反应的目的，对药物的杂质进行分离、鉴定是一项关键性的技术。

依托度酸(Etodolac)又称乙哚酸、吲哚吡喃乙酸、罗丁等，商品名为Lodine，是新一代的COX-2高选择性非甾体抗炎药，其作用效果与阿司匹林相似，是在炎症部位通过阻断环氧合酶的活性，从而有选择性地抑制前列腺素的生物合成。对胃PGE2的抑制轻微、短暂，因此胃肠道不良反应较小。口服吸收迅速。依托度酸最早是由美国的AHP的子公司开发，于1985年在英国成功上市，后在法国、美国、德国、日本等国相继上市。依托度酸在生产过程中会形成微量杂质，其中包括2-(7-乙基-1H-吲哚-2-基)乙酸乙酯2-(1,8-二乙基-1,3,4,9-四氢吡喃[3,4-b]吲哚-1-基(以下简称杂质A)，其分子式为C₂₉H₃₄N₂O₃，化学结构如式I所示。由于杂质A在依托度酸中的含量极低(0.5％)，采用传统的分离方法(如萃取、重结晶、蒸馏和传统柱色谱)很难将其分离，而制备型高效液相色谱由于使用昂贵的色谱级试剂以及C18制备色谱柱，使用成本高、分离纯化时间长。

与传统的液-固色谱方法相比，近年来逐渐在分离科学领域绽露头脚的一项液-液分配色谱技术---高速逆流色谱(High-Speed Countercurrent Chromatography,HSCCC)，由于不使用固相载体而显示出了与众不同的优势，作为现有液-固制备色谱方法的有效补充，已成为颇具前景的一项制备型色谱技术。逆流色谱利用两互不相溶的溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡，使物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现。由于不采用固体支撑体，该技术完全排除了因不可逆吸附而引起的样品污染、变性、失活等，不仅简化了样品的预处理工作，且可以通过多种洗脱方式对滞留于色谱柱中的样品予以完全回收。此外，该方法操作成本低廉，制备量易于放大(根据需要一次上样量可以从几毫克到十几克不等)。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种从依托度酸中分离制备微量杂质A的方法；以便于对依托度酸系列产品进行质量控制。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种依托度酸原料药中一个微量杂质(微量杂质A)的分离制备方法，微量杂质的分子式为C₂₉H₃₄N₂O₃，

采用梯度洗脱的高速逆流色谱法对依托度酸原料药中的微量杂质进行分离制备；

逆流色谱法的溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：乙醇：水；洗脱模式为梯度洗脱；