[发明专利]一种犬猫细小病毒VP2350-420

说明书

一种犬猫细小病毒VP2_350‑420蛋白及其制备方法与应用。本发明公开了一种蛋白及其制备方法与应用。该蛋白的氨基酸序列如细小病毒中VP2蛋白的第350～420位氨基酸序列所示或具有所述蛋白功能的对细小病毒中VP2蛋白的第350～420位氨基酸序列进行一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加修饰的变体，具有高度保守、抗原性高、亲水性强等优点，可用于制备预防和/或治疗犬/猫细小病毒病的药物。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种犬猫细小病毒VP2_350-420蛋白及其制备方法与应用。

背景技术

犬、猫细小病毒分别被认为危害犬和猫最为严重的病毒之一，分别引起较高的死亡率，用药物防治的治愈率很低。其中犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)，可感染各种年龄的犬，以90日龄以下的较多，引发犬的急性出血性肠炎和心肌炎。猫细小病毒(Felineparvovirus，FPV)，可感染猫科动物，以3-5月龄的幼猫发病最多，引发急性肠炎、泛白细胞减少症。两种病的发病年龄，临床症状也较为相似。犬猫细小病毒同属细小病毒科细小病毒属成员，在基因组水平上的相似性达97％以上，含有两个开放阅读框，可以表达产生VP1和VP2两种结构蛋白以及NS1和NS2两种非结构蛋白。VP1、VP2蛋白是能够产生体液免疫和细胞免疫的重要抗原，在病毒免疫中占有重要地位，其中VP2蛋白是主要的结构蛋白，犬细小病毒和猫细小病毒VP2基因的相似性在97.1％-99.9％之间，VP2蛋白不但是能够诱导机体产生中和抗体的主要保护性抗原，也是决定犬猫细小病毒血凝性和宿主范围的蛋白。有研究人员将犬细小病毒VP2基因上编码主要抗原表位克隆于真核表达载体pVAX1中构建了犬细小病毒VP2的DNA疫苗，结果显示其重组质粒能够在COS-7细胞中正确表达并有良好的免疫原性，将该重组质粒免疫小鼠犬，能够诱导小鼠犬只产生较高的抗体水平一定的免疫保护力。但是DNA疫苗在使用安全性方面存在一定的争议，并且市场上目前还没有在犬猫间通用的细小病毒基因工程疫苗。

发明内容

为了现有技术的不足，本发明的第一方面的目的，在于提供一种蛋白。

本发明的第二方面的目的，在于提供一种编码第一方面的蛋白的多核苷酸。

本发明的第三方面的目的，在于提供一种包含第二方面的多核苷酸的质粒。

本发明的第四方面的目的，在于提供一种包含第三方面的质粒的工程菌。

本发明的第五方面的目的，在于提供第一方面的蛋白的制备方法。

本发明的第六方面的目的，在于提供第一方面的蛋白在制备预防和/或治疗犬/猫细小病毒病的药物中的应用。

本发明的第七方面的目的，在于提供一种包含第一方面的蛋白的疫苗。

为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供一种蛋白，所述蛋白的氨基酸序列为：

a)如细小病毒中VP2蛋白的第350～420位氨基酸所示的氨基酸序列；

或b)如细小病毒中VP2蛋白的第350～420位氨基酸所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加修饰后且具有所述蛋白功能的序列。

所述细小病毒优选为猫细小病毒和犬细小病毒中的至少一种。

优选的，所述蛋白的氨基酸序列为：

a)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；

或b)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加修饰后且具有所述蛋白功能的序列。

本发明的第二个方面，提供一种编码第一方面的蛋白的多核苷酸。